Нуклеопептид инструкция: Купить Нуклеопептид 100 мл стимулятор роста Экохимтех в интернет магазине 33 коровы

Содержание

Нуклеопептид (ДЛЯ ЖИВОТНЫХ) раствор для инъекций, 100 мл : инструкция + цена в аптеках

Состав

Основное действующее вещество — низкомолекулярные пептиды, вспомогательное — вода для инъекций.

Описание

Нуклеопептид (Nucleopeptid) — торговая марка препарата, который имеет международное наименование — низкомолекулярные пептиды. Препарат представляет собой экстракт, полученный с помощью автолиза из селезенки КРС.

Нуклеопептид — непрозрачная жидкость, цвет которой может изменяться от светло-желтого до желто-коричневого. При встряхивании жидкость вспенивается. После отстаивания образуется осадок, который легко разбивается.

Лекарственная форма:
раствор, предназначенный для инъекций.

Фармакологические свойства

Нуклеопептид — натуральный ветеринарный препарат группы биогенных стимуляторов.

В составе лекарственного средства содержится продукт автолиза селезенки КРС — термостабильные пептиды, обладающие биологической активностью. Эти соединения оказывают стимулирующее действие на клеточный и гуморальный иммунитет, а также улучшают резистентность организма, развитие и набор массы животными.

Нуклеопептид — малоопасное вещество, которое относится к 4 классу опасности. Его применение в дозах, рекомендуемых производителем, не вызывает местных раздражений и не становится причиной аллергических реакций.

Способ применения

Для новорожденных поросят ветеринарное средство назначают перорально. Дозировка составляет 25-30 мл на каждую голову.

Для новорожденных телят дозировка препарата составляет 100-150 мл на голову. Его дают животным в первые 3 дня жизни за один час до выпойки молозива.

Для откорма животных препарат вводится под кожу в область средней части шеи 4 раза с интервалом 15 суток. Дозировка составляет 0,1-0,2 мл на 1 кг массы. Максимальная доза — 30 мл.

Для кошек и собак ветеринарное средство вводится перорально или подкожно один раз в день. В первом случае дозировка составляет 0,2-0,3 мл на 1 кг массы животного, во втором — 0,1-0,2 мл. Курс длится 3-5 дней.

Перед употреблением жидкость следует взболтать.

Побочное действие

При приеме нуклеопептида в соответствии с инструкцией по применению и при передозировке побочные эффекты и осложнения не наблюдаются.

Прием ветеринарного средства с другими препаратами не приводит к появлению побочных эффектов.

Особенности применения

Первое применение и прекращение приема ветеринарного средства не имеет негативных последствий для здоровья животных.

Препарат не рекомендуется вводить беременным животным и в период лактации.

При пропуске приема лекарственного средства курс лечения продолжают в соответствии с рекомендациями производителя.

Животноводческая продукция при приеме нуклеопептида пригодна к употреблению в пищу без ограничений.

Предостережение

Работа с препаратом требует соблюдения правил личной гигиены и безопасного обращения с ветеринарными средствами.

При случайном попадании препарата на кожу или слизистую глаз место контакта следует промыть проточной водой. При индивидуальной непереносимости его компонентов следует предпринять дополнительные меры безопасности, чтобы исключить контакт.

Если препарат случайно попал в организм или появились признаки аллергической реакции, необходимо как можно скорее обратиться за квалифицированной медицинской помощью. Рекомендуется иметь при себе инструкцию по применению нуклеопептида.

Условия хранения

В упаковке в сухом месте, в которое не проникают прямые солнечные лучи. Не разрешается пребывание лекарственного средства по соседству с продуктами питания и кормами. Рекомендуемая температура хранения — +2°С-+20°С.

Ветеринарный препарат следует беречь от детей.

При отсутствии маркировки на ампулах и флаконах, окончании срока годности, разгерметизации, наличии в содержимом посторонних примесей и изменении его цвета препарат подлежит утилизации. Неиспользованный в течение 12 часов остаток также должен быть утилизирован.

Срок годности

До 2 лет с момента производства при отсутствии нарушений условий хранения. Просроченное лекарственное средство использовать запрещается.

Форма выпуска

Герметично запаянные ампулы, объемом 1 мл, а также стеклянные флаконы, содержащие 5, 10 и 100 мл препарата. Флаконы герметично укупорены с помощью резиновых пробок, для укрепления которых используют алюминиевые колпачки.

В качестве упаковки ампул по 1 или 5 штук используют картонные пачки, которые снабжаются гофрированным вкладышем, изготовленным из пачечной бумаги. Каждая упаковка содержит инструкцию по применению лекарственного средства.

Производитель

Владелец регистрационного удостоверения и производитель:

ООО «ЭКОХИМТЕХ», Россия.

инструкция по применению в ветеринарии

Инъекционные препараты, изготовленные из органов или тканей животных, способны нормализовать взаимодействие гормональных регуляторов обмена. Грамотное применение биостимуляторов способствует формированию механизмов защиты организма от вторжения возбудителей заболевания.

Данная статья — это адаптированная для непрофессионалов инструкция по применению изготовленного из бычьей селезенки иммуностимулирующего средства Нуклеопептида в животноводстве.

Состав и форма выпуска

Лекарственный препарат содержит нижеперечисленные действующие компоненты:

рекомендуемые статьи:

Ветеринарный препарат Сурфагон
Тетравит: инструкция по применению в ветеринарии

Пептиды.
Нуклеозиды.
Пиримидиновые и пуриновые основания.

Инъекционное средство выглядит непрозрачной желтовато-коричневой жидкостью светлого или насыщенного оттенка. При отстаивании образуется гуща, которая устраняется встряхиванием. При этом содержимое вспенивается. Лекарство разлито по стерильным флаконам 5; 10; 100; 200 см³, а также ампулам по 1 мл.

Фармакология

Компоненты Нуклеопептида стимулируют секрецию гормонов тироидной железы. Результатом становится нормализация азотистого обмена, активация регуляторов роста. Запускаются механизмы синтеза интерферона, что способствует повышению резистентности организма. У печени появляются дополнительные ресурсы для осуществления детоксикационной функции.

Возрастает усвояемость компонентов корма, что проявляется увеличением продуктивности. Нуклеопептид позитивно влияет на состояние шерсти, а также кожи. Лекарство удачно сочетается с противомикробными, химиотерапевтическими средствами, премиксами, витаминными добавками. Вещества — компоненты биостимулятора, не оказывают неблагоприятного воздействия на организм, поэтому медикамент относят к безопасным средствам.

Нуклеопептид можно выпаивать

Показания

Нуклеопептид назначают при следующих обстоятельствах:

Для молодняка свиней и жвачных с целью иммунной коррекции, а также повышения приростов.
Собакам и котам:

Для стимуляции роста молодняка.
Чтобы нарастить мускульную массу взрослым особям.
Для лечения дерматитов, отитов, улучшения состояния шерстного покрова.
При подготовке к выставке либо перед транспортировкой для снятия стресса, а также укрепления иммунитета.

Способы применения

Инъектор наполняют содержимым флакона, гомогенизированным при встряхивании. Препарат употребляют для следующих видов животных:

Жвачные и свиньи.
Собаки, кошки.
Пушные звери.
Птица.

Жвачные и свиньи

Новорожденным лекарства вводят орально следующими дозами:

Телятам — однократно по 100–150 см³ трое суток подряд.
Ягнятам и поросятам — единовременно, по 25–30 мл.

Растущему и откормочному поголовью для стимуляции приростов практикуют подкожные инъекции в нижнюю часть шеи 0,15 мл/кг массы трое суток подряд. Дальнейший курс предусматривает 4–6 инъекций с двухнедельным интервалом. В одну точку не следует вводить более 30 см³Нуклеопептида. За 10 суток до предполагаемого забоя препарат отменяют.

Собаки и кошки

Новорожденным детенышам Нуклеопептид вводят орально. Единовременная доза составляет 2–10 мл и зависит от массы малыша. Курс дачи препарата ограничивается тремя днями. Порция для принятия внутрь для собачьих и кошачьих щенков составляет 0,3 мл/кг, при инъекционном употреблении прокалывают в 2 раза меньше. Препарат принимают 3 суток.

Им пора выпаивать Нуклеопептид

В жизни плотоядных животных бывают моменты, когда требуется использовать Нуклеопептид. Это физические перегрузки, линька либо необходимость привести в порядок шерстный покров. Показан курс из 12–15 инъекций с двухнедельным промежутком по 0,3 мл/кг. Если есть необходимость повторения, цикл возобновляют после двухмесячной передышки.

Программа подготовки к выставке включает профилактическую обработку животного Нуклеопептидом. Делать это надо заблаговременно, за 4 недели до мероприятия. На протяжении 3–5 дней питомцу прокалывают лекарство в стандартной дозировке, 0,3 мл/кг.

Взрослым котам и псам Нуклеопептид назначают при комплексном лечении кожных или хронических заболеваний, токсикозах щенности, кровепаразитарных недугах по 0,15 мл/кг 5–7 дней кряду.

Нуклеопептид обеспечивает идеальное состояние шерстного покрова

Пушные звери

Нуклеопептид назначают для ускорения роста и повышения качества меха. Кроме подкожного, допускается внутримускульное или оральное введение в таких же дозах, что и собакам. Чтобы повысить качество меха, за 4–6 недель до убоя зверей прокалывают 5 суток в стандартной дозировке.

Нуклеопептид помогает улучшить качество меха пушным зверям

Птица

Если домашняя птица имеет взъерошенное оперение и угнетенное состояние, ей заливают 0,5–2,0 мл биостимулятора 5–7 суток подряд.

Побочные действия

При употреблении Нуклеопептида существует возможность обострения перманентно протекающего недуга. При продолжении лечения болезненные симптомы ослабевают. Нельзя исключать аллергической реакции гиперчувствительной особи на компоненты препарата.

Противопоказания

Запрещается применять Нуклеопептид истощенным животным и при острых заболеваниях, сопровождающихся гипертермией. Препарат усугубляет поствакцинальные осложнения.

Ограничения

Нуклеопептид отменяют за 10 суток до предполагаемого убоя животного.

Условия хранения

Нуклеопептид не выдерживает замораживания и перегрева. Его держат в защищенном от солнечной радиации месте при 2–25 ºC. Такие условия сохраняют терапевтические свойства препарату 2 года. Если в ампуле или флаконе обнаружены твердые частицы или осадок не разбивается при встряхивании, лекарство применять нельзя. Вскрытая ампула или флакон сохраняется в холодильнике в течение суток.

В распоряжение животновода поступил еще один препарат, который позволяет повышать привесы, предотвращать заболевания, придавать привлекательность домашним питомцам. При этом нет нужды в применении антибиотиков и химиотерапевтических препаратов.

Нуклеопептид раствор для инъекций (1 фл.х 100 мл)

Состав
Нуклеопептид (Nukleopeptid) представляет собой очищенный экстракт селезенки крупного рогатого скота, полученный путем автолиза. Содержит низкомолекулярные пептиды, образовавшиеся в результате автолиза тканей — не менее 1мг/мл. Не содержит генно-инженерно–модифицированных продуктов.

Описание
По внешнему виду представляет собой непрозрачную жидкость от светло-желтого до желто–коричневого цвета, вспенивающуюся при встряхивании. При отстаивании выпадает легко разбивающийся осадок.

Фармакологические свойства
Содержит пептиды, нуклеозиды, основания нуклеотидов и другие биологически активные вещества. Благодаря стимулирующему действию этих соединений на ферментативные процессы клеток, Нуклеопептид оказывает регуляторное и стимулирующее действие на гормональный статус и иммунную систему животных, активирует синтез медиаторов роста животных, повышает резистентность организма , улучшает шерстной покров и стимулирует увеличение массы тела.

Порядок применения
Нуклеопептид применяют для увеличения привесов при откорме и повышения резистентности молодняка крупного рогатого скота и свиней.
Собакам и кошкам Нуклеопептид применяется с целью увеличения прироста у молодняка и мышечной массы у взрослых животных, для восстановления и улучшения шерстного покрова при кожных заболеваниях, затяжной линьке и у выставочных животных. Кроме того, Нуклеопептид применяется при хронических неспецифических заболеваниях — хронический отит, экземы, дерматиты, фурункулез и др., отставание в росте и развитии, гипотрофия, а также для повышения резистентности.
Новорожденным поросятам Нуклеопептид применяют перорально в дозе 25–30 мл/гол, новорожденным телятам в дозе 100–150 мл/гол за 1 час до выпойки молозива в течение первых трех дней жизни, 1 раз в сутки.
Молодняку крупного рогатого скота и свиней Нуклеопептид вводят подкожно или внутримышечно в дозе 0,1–0,2 мл/кг живой массы, один раз в сутки в течение 3-х дней.
Откормочным животным для увеличения привесов Нуклеопептид вводят подкожно в среднюю треть шеи в дозе 0,1-0,2 мл/кг живой массы, но (но не более 30 мл) один раз в день в течение 3-х дней, в дальнейшем 1 раз в 15 дней в течение 2-3 месяцев. За 10 дней до убоя животного прием препарата прекращают.
Новорожденным котятам и щенкам: перорально в дозе 2-3 мл для мелких животных , 5-10 мл для крупных, 1 раз в день перед кормлением, 3 дня подряд.
Подрощенным щенкам, котятам и взрослым кошкам и собакам: подкожно в дозе 0,1-0,2 мл/кг массы тела или внутрь в дозе 0,2-0,3 мл/кг 1 раз в день в течение трех дней.
Выставочным животным и собакам бойцовых пород: подкожно в дозе 0,1-0,2 мл/кг или внутрь в дозе 0,3-0,4 мл/кг 3-5 дней подряд за 1 месяц до выставки или 1 раз в 15 дней в той же дозе в течение активного периода, но не более 6 месяцев. Между курсами необходим перерыв в 2-3 месяца.
Кошкам и собакам при хронических заболеваниях: подкожно или внутрь по 0,1-0,4 мл на кг массы тела ежедневно в течение 5-7 дней, в комплексе со специфической терапией. При необходимости курс повторяют через месяц.

Побочные действия
Не выявлено. В очень редких случаях возможно развитие аллергической реакции. Может обострять течение хронических и скрытых заболеваний, что не является основанием для отмены препарата.

Противопоказания

Нуклеопептид для собак — инструкция по применению

Внимательные и заботливые хозяева домашних животных стараются поддерживать их здоровье не только в периоды болезней, а занимаются и их профилактикой. Иммуностимуляторы, витамины, биологически активные добавки, подкормки позволяют повышать защитные силы организма собак и противостоять различным заболеваниям. Одно из таких ветеринарных средств — Нуклеопептид. Детально узнаем о его преимуществах, составе, предназначении и способах использования.

Характеристика препарата

Он представляет собой экстракт из селезенки крупного рогатого скота. Биопрепарат содержит нуклеозиды и пептиды, другие активные соединения. Средство выглядит как непрозрачная жидкость желтоватого или желто-коричневого цвета. При встряхивании она вспенивается.

Нуклеопептид — ветеринарный препарат отечественного производства. Его расфасовывают в стеклянные флаконы разного объема и герметично закупоривают. Есть емкости по 5, 10 и 100 мл.

Достоинством этого ветеринарного средства является его натуральность, природный состав. Компоненты Нуклеопептида положительно влияют на обменные процессы, регулируют иммунный и гормональный статус домашних и сельскохозяйственных животных.

Ветеринарное средство повышает синтез тиреоидных гормонов, которые стимулируют развитие организма, его рост, дифференциацию тканей. Препарат оказывает анаболическое действие.

Пептиды в составе лекарства являются низкомолекулярными, они обладают функциями регуляции, что позволяет применять его в лечении хронических и аутоиммунных недугов животных. Средство повышает устойчивость организма собак за счет активизации синтеза интерферона. Результатом его применения является резистентность клеток печени к воздействию ядов, токсинов; улучшение состояния кожно-волосяного покрова. Еще одно достоинство Нуклеопептида в том, что он существенно увеличивает среднесуточный набор массы тела в период роста животного.

Инструкция информирует, что ветеринарное средство можно использовать в комплексе с антибактериальными препаратами, химиотерапевтическими лекарствами, витаминно-минеральными добавками.

Что касается степени воздействия этого биопрепарата на организм собак, то оно абсолютно нетоксично. В рекомендуемых инструкцией дозах препарат не обладает сенсибилизирующим и резорбтивно-токсическим действием.

Как правильно использовать Нуклеопептид для собак

Биопрепарат назначают для повышения резистентности молодняка. Собакам его рекомендуют давать в период до года для ускорения роста. Взрослым особям биопрепарат можно использовать для увеличения мышечной массы, восстановления шерстного покрова. Ветеринары нередко назначают его при кожных недугах для улучшения качества шерсти. Заводчики применяют это средство перед выставками для того, чтобы улучшить внешний вид шерсти собак.

Также Нуклеопептид прописывают как компонент комплексного лечения хронических воспалительных заболеваний кожного покрова псов. Используют биопрепарат в терапии отитов, при отставании животного в физическом развитии.

Инструкция четко определяет дозировку средства для разных животных. Она зависит от их массы тела. Так, с целью активизации роста собак рекомендуется вводить подкожно 0,1-0,2 мл средства на один килограмм веса питомца. Делают это один раз в сутки на протяжении трех дней. Затем ставят одну инъекцию в 15 дней на протяжении 2-3 месяцев.

Новорожденным щенкам мелких пород Нуклеопептид вводят по 2-3 мл разово, а средним и крупным — по 5-10 мл. В этом случае средство капают в ротовую полость перед кормлением в течение трех суток. Щенкам от трех месяцев биопрепарат рекомендуется применять при воспалительных недугах подкожно. Дозировку в этом случае определит ветеринар.

Если у владельца возникла необходимость улучшить состояние шерсти пса (например, перед выставкой или после перенесенных кожных заболеваний), то средство применяют в дозе 0,1-0,2 мл на килограмм веса три дня подряд. Если пес служебный, усиленно тренируется и испытывает повышенные физические нагрузки, то препарат применяют в тех же дозах один раз в 15 дней на протяжении полугода.

В комплексной терапии кожных заболеваний биопрепарат назначают собакам в дозе 0,1-0,4 мл/кг массы тела.

Единственным ограничением в использовании Нуклеопептида является его индивидуальная непереносимость.

Нуклеопептид — инструкция по применению стимулятора роста

Ветеринарные препараты

Препарат изготавливает российское предприятие «Экохимтех». Активные компоненты — метилглиоксаль, лизин. Терапевтическая форма — раствор для инъекций.

Ветеринарные препараты

Препараты изготавливает российская фирма «Экохимтех». Активный компонент — биомасса живых бактерий Bacillus subtillis, применяется в

Ветеринарные препараты

Препарат выпускает французская фирма Virbac. Действующие компоненты — перметрин, фипронил. Терапевтическая форма — раствор для наружного

Ветеринарные препараты

Биопрепараты выпускает французская компания Merial. Терапевтическая форма — лиофилизированная таблетка и растворитель. Вакцины фасуют во

Ветеринарные препараты

Препарат выпускает чешская компания Bioveta, a.s. Активный компонент — клопростенол, зарегистрирован ВОЗ. Лекарственная форма — раствор

Ветеринарные препараты

Препарат изготавливает белорусское предприятие «Белэкотехника». Активные компоненты — тилозин, сульфадимидин, колистин, триметоприм. Терапевтическая форма — порошок

Нуклеопептид инструкция по применению. Прочтите, прежде чем использовать Нуклеопептид для собак

ИНСТРУКЦИЯ

по применению биопрепарата Нуклеопептид (Nycleopeptid)

1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

1.Нуклеопептид (Nukleopeptid) представляет собой очищенный экстракт селезенки крупного рогатого скота, полученный путем автолиза. Содержит низкомолекулярные пептиды, образовавшиеся в результате автолиза тканей — не менее 1мг/мл. Не содержит генно-инженерно–модифицированных продуктов.

2. По внешнему виду представляет собой непрозрачную жидкость от светло-желтого до желто–коричневого цвета, вспенивающуюся при встряхивании. При отстаивании выпадает легко разбивающийся осадок. Выпускают расфасованным по 1 мл в ампулы соответствующей вместимости, герметично запаянных, помещенных по 10 штук в пачку из картона с гофрированным вкладышем из бумаги пачечной, или по 5, 10 и 100 мл в стеклянных флаконах соответствующей вместимости, герметично укупоренных резиновыми пробками и обкатанных алюминиевыми колпачками.

3. Хранят Нуклеопептид в упаковке производителя в сухом, защищенном от прямых солнечных лучей месте при температуре от 2°С до 20°С. Вскрытые флаконы хранят не более суток в холодильнике. Перед применением препарат взбалтывать.

Срок годности Нуклеопептида при соблюдении условий хранения – 2 года со дня изготовления. Запрещается использовать Нуклеопептид после окончания срока его годности.

II. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

4. Содержит пептиды, нуклеозиды, основания нуклеотидов и другие биологически активные вещества. Благодаря стимулирующему действию этих соединений на ферментативные процессы клеток, Нуклеопептид оказывает регуляторное и стимулирующее действие на гормональный статус и иммунную систему животных, активирует синтез медиаторов роста животных, повышает резистентность организма, улучшает шерстной покров и стимулирует увеличение массы тела.

III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ

6. Нуклеопептид применяют для увеличения привесов при откорме и повышения резистентности молодняка крупного рогатого скота и свиней.

Собакам и кошкам Нуклеопептид применяется с целью увеличения прироста у молодняка и мышечной массы у взрослых животных, для восстановления и улучшения шерстного покрова при кожных заболеваниях, затяжной линьке и у выставочных животных. Кроме того, Нуклеопептид применяется при хронических неспецифических заболеваниях — хронический отит, экземы, дерматиты, фурункулез и др., отставание в росте и развитии, гипотрофия, а также для повышения резистентности.

Новорожденным поросятам Нуклеопептид применяют перорально в дозе 25–30 мл/гол, новорожденным телятам в дозе 100–150 мл/гол за 1 час до выпойки молозива в течение первых трех дней жизни, 1 раз в сутки.

Молодняку крупного рогатого скота и свиней Нуклеопептид вводят подкожно или внутримышечно в дозе 0,1–0,2 мл/кг живой массы, один раз в сутки в течение 3-х дней.

Откормочным животным для увеличения привесов Нуклеопептид вводят подкожно в среднюю треть шеи в дозе 0,1-0,2 мл/кг живой массы, но (но не более 30 мл) один раз в день в течение 3-х дней, в дальнейшем 1 раз в 15 дней в течение 2-3 месяцев. За 10 дней до убоя животного прием препарата прекращают.

Новорожденным котятам и щенкам: перорально в дозе 2-3 мл для мелких животных, 5-10 мл для крупных, 1 раз в день перед кормлением, 3 дня подряд.

Подрощенным щенкам, котятам и взрослым кошкам и собакам: подкожно в дозе 0,1-0,2 мл/кг массы тела или внутрь в дозе 0,2-0,3 мл/кг 1 раз в день в течение трех дней.

Выставочным животным и собакам бойцовых пород: подкожно в дозе 0,1-0,2 мл/кг или внутрь в дозе 0,3-0,4 мл/кг 3-5 дней подряд за 1 месяц до выставки или 1 раз в 15 дней в той же дозе в течение активного периода, но не более 6 месяцев. Между курсами необходим перерыв в 2-3 месяца.

7. Побочных действий не выявлено. В очень редких случаях возможно развитие аллергической реакции. Может обострять течение хронических и скрытых заболеваний, что не является основанием для отмены препарата.

8. Противопоказанием является индивидуальная повышенная чувствительность животного к компонентам препарата. Не рекомендуется назначать препарат животным в период иммунизации, а также при острых инфекционных заболеваниях и истощении.

9. Нуклеопептид совместим с другими лекарственными средствами и кормовыми добавками.

10. Мясо и продукты убоя животных, которым применяли Нуклеопептид, используются в пищевых целях без ограничений.

IV. МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

11. При работе с Нуклеопептидом следует соблюдать общие санитарные правила.

При попадании лекарственного средства на слизистую оболочку глаза промыть водой.

12. Хранить в местах недоступных для детей.

Собаки. Наши любимые питомцы! Они нуждаются в постоянном уходе и заботе. Особенно когда они совсем еще маленькие, беззащитные, или когда заболевают, а также когда им предстоит показать свой потенциал на серьезных выставках и турнирах.

Здоровье питомцев во многом зависит от правильно подобранного корма, от полноценного рациона питания. Однако правильный ход метаболических процессов в организме животных не обходится без участия комплекса биологически активных веществ. Актуальной задачей ветеринарии сегодня является разработка и внедрение препаратов нового класса, которые будут направлены на нормализацию обмена веществ и повышение иммунного статуса, на усиление устойчивости организма собак к негативным факторам среды.

В такие моменты на помощь приходят БАДы, которые с успехом применяются в ветеринарии. Спектр их действия широк, а разнообразие их видов велико. При этом большинство из них синтетического происхождения, часто вызывающие нежелательные побочные эффекты.

На рынке ветеринарной фармакологии появился иммунотропный органопрепарат натурального происхождения «Нуклеопептид» (производитель — «Экохимтех», г. Уфа). Он представляет собой комплекс нуклеотидов, пептидов и органических кислот , экстрагированных из селезенки крупного рогатого скота. Терапевтическое использование пептидсодержащей фракции этого органа имеет давнюю историю. Поскольку селезенка — это орган иммунной системы, то выделенные из нее вещества тоже обладают свойством воздействовать, запускать защитные механизмы организма, раскрывать и повышать резервные возможности.

Нуклеотиды — это «кирпичики», из которых строятся нуклеиновые кислоты – дезоксирибонуклеиновая (ДНК) и рибонуклеиновая (РНК) — носители генетической информации, и тем самым регулируют обмен веществ и энергии. Другой компонент — пептиды (или белки) выполняют многочисленные функции, регулируют великое множество физиологических процессов, в частности процессы регенерации, роста, обмена веществ.

Свойства

Совокупное действие этих ингредиентов «Нуклеопептида» позволяет использовать его как:

Стимулятор обменных процессов в организме . «Нуклеопептид» регулирует обмен белков. Судя по отзывам владельцев домашних собак, а также питомников, бойцовых, служебных пород, «Нуклеопептид» улучшает аппетит и усвоение пищи, т.е. способствует росту мышечных волокон, увеличивает массу тела при его дефиците. Состояние кожного покрова улучшается. Шерсть становится гладкой, блестящей и густой, более пигментированной. Его прием помогает животным переживать стресс, восстанавливаться после болезни, операций. Таким образом, оказывает анаболическое действие, ускоряя образование и обновление структурных компонентов организма.
Иммуностимулятор . Прием препарата «Нуклеопептид» в дополнение к основному курсу лечения ускоряет процесс регенерации кожного покрова. Это подтверждают клинические данные обследования собак с кожными заболеваниями. В опытной группе количество выздоровевших животных на 18% больше, чем в контрольной. Подобный эффект «Нуклеопептида» имеет очень важное значение для собак на этапе подготовки к выставкам, на которых оцениваются так называемые экстерьерные признаки, в первую очередь качество шерстного покрова.

Форма выпуска

«Нуклеопетид» представляет собой желтоватую или желто-коричневую жидкость в емкостях объемом 5, 10, 100 мл. Хранят в прохладном, темном месте при температуре 2-20°C. Срок годности составляет 2 года.

Способ применения

Для увеличения росто-весовых показателей, для улучшения экстерьерных признаков и повышения жизненного потенциала в общем:

Слаборазвитым, новорожденным щенкам с маленьким весом в течение 3 дней внутрь дают препарат в количестве 2-3 мл ; более крупным – по 5-10 мл . Следует давать перед кормлением один раз в день.
Подросшим щенкам и взрослым собакам вводится под кожу на каждый килограмм веса в объеме от 0,1 до 0,2 мл или перорально от 0,3 до 0,4 мл один раз в пятнадцать дней. Если предстоит выставка, то та же доза в течение 3-5 дней за месяц до мероприятия.

При затяжных хронических заболеваниях разного генеза, для ускорения линьки вводят на каждый килограмм веса под кожу или внутримышечные инъекции по 0,1 -0,2 мл на протяжении 5-7 дней в дополнение к основному лечению.

Показания к применению

Побочные эффекты

«Нуклеопептид» малоопасен и гипоаллергенен, если использовать его в рекомендуемых дозах, и по сути представляет собой полезную пищевую добавку. Можно использовать в сочетании с другими лекарственными средствами и витаминами. Изредка появляется аллергия, обостряются инфекционные заболевания. Но даже при этом его не стоит отменять.

Противопоказания

Аллергическая реакция к компонентам препарата; период вакцинации и иммунизации; инфекционные заболевания в острой фазе.

Таким образом, «Нуклеопептид» – это средство с широким спектром физиологических эффектов. Выступает в качестве адаптогена, иммуномодулятора, биостимулятора. Практически безвреден, цена доступная. Результативность доказана экспериментально.

Наши питомцы не меньше нас нуждаются в витаминах, укреплении иммунитета и защитных сил организма.

Хорошие хозяева во время болезни своих собак дают им различные витамины, биологически активные добавки, подкормки, чтобы вирус не зашел слишком далеко и не дал плохих осложнений. Среди таких ветеринарных средств — Нуклеопептид.

Нуклеопептид — биопрепарат, изготовленный из селезенки рогатого скота, с добавлением различных полезных веществ и компонентов. Является универсальным средством и широко применяется для разных видов животных, в том числе и для собак.

Он укрепляет иммунитет вашего питомца, а также ускоряет рост и развитие, улучшает обмен веществ, восстанавливает гормональный фон.

Его применяют для увеличения массы тела животного, при нарушениях покровного слоя, чтобы шерсть становилась гуще и лучше.

Примерные болезни собак, когда необходимо давать Нуклеопептид:

отит;
дерматит;
экзема;
выпадение шерсти;
уменьшение в весе, истощение;
фурункулез;
токсикоз при беременности;
отставание в развитии роста;
различные кожные заболевания и воспаления;
интоксикация организма;
ослабленный иммунитет и др.

Инструкция по применению

Хранить препарат необходимо вдали от попадания солнечных лучей, в хорошо проветриваемом помещении, при 2-25 градусах по Цельсию.

Как давать?

Применение и дозировка Нуклеопептида напрямую зависит от причины приема. Его колоть в виде инъекций, а можно просто вливать в ротовую полость вместе с водой.

Перед применением флакон с препаратом необходимо взболтать!

Дозировка

Рассмотрим самые распространенные причины для лечения Нуклеопептидом и дозировки.

Если вы готовите свою собаку к выставке или соревнованиям и вам нужно увеличить ее массу, а также улучшить качество шерсти, то нужно делать ей подкожные инъекции.

За месяц до проводимого мероприятия на протяжении 5 дней необходимо делать по одному уколу 0,1мл на 1 к веса. Или же по другой схеме: делать инъекцию раз в 15 дней. Курс лечения не должен длиться больше полугода, обязательно нужно делать перерывы в 2-3 месяца.

Для повышения иммунитета в плохую погоду или же в периоды стресса животного, нужно делать ему уколы на протяжении 3 дней. На 1 кг 0,1мл-0,2 мл.

Если вашего питомца настигло какое-нибудь хроническое заболевание вроде отита или экземы, то нужно провести комплекс лечения в течение недели, принимая лекарство с расчетом, что на 1кг веса необходимо 0,1-0,4 мл жидкости. Принимать Нуклеопептид (подкожно или внутрь) параллельно с основным лечением. При необходимости повторить курс спустя 1-1,5 месяца.

Побочные эффекты

Препарат не имеет ярко выраженных негативных последствий после применения. Именно поэтому его можно употреблять даже щенкам, беременным и кормящим собакам.

Конечно, перед применением лучше проконсультироваться с ветеринаром, ведь как и в любом лекарственном средстве, в Нуклеопептиде есть компоненты, на которые у животного может развиться аллергия. Вероятность этого мала, но все же она есть.

Не нужно применять препарат, если у животного повышенная температура и озноб.

Если препарат вводится подкожно, то необходимо аккуратно работать с ним, соблюдать правила личной гигиены, чтобы не занести какую-нибудь заразу или инфекцию.

Если срок годности раствора истек, то его необходимо выбросить, а не применять на своем животном.

Щенкам

Щенкам чаще всего дают Нуклеопептид для ускорения их роста и развития. Новорожденным назначают по 2-3 мл разово для мелких представителей, 5-10мл для более крупных.

Новорожденным щенкам лучше давать раствор в ротовую полость, а не в виде инъекции, перед приемом пищи, на протяжении 3-4 суток.

Щенкам, которым больше 3 месяцев, можно делать инъекции с препаратом во время болезней. Дозировку определит лечащий ветеринар, ни в коем случае не нужно придумывать ее самостоятельно.

Беременным и кормящим

Нет противопоказаний для приема Нуклеопептида беременным и кормящим животным. Но если вы захотите начать давать своей собаке этот препарат, то о его дозировке и частоте приема лучше узнать у врача во избежание аллергии.

Во время токсикоза собакам наоборот советуют давать Нуклеопептид, он способствует прекращению тошноты и ослабленного состояния.

Перед прививкой

Прежде чем начать принимать Нуклеопептид перед прививкой, лучше проконсультироваться со специалистом. Потому что у каждой лекарственной прививки свои компоненты, которые при сочетании с компонентами Нуклеопептида могут вызвать аллергическую реакцию. Для всех животных это индивидуально.

Породные особенности

Исключений среди каких-либо пород нет. Нуклеопептид можно принимать любой породе собак. Все зависит от индивидуальной переносимости компонентов данного средства.

Отзывы

Собаководы

1. «Я подобрала свою собаку на улице еще малышкой, когда она была в хилом и болезненном состоянии. Она была очень худая и щуплая. Сначала вообще ничего не хотела есть, кормить приходилось через пипетку. Думали, что долго она не протянет, ну уж очень слабая была.

Отвели к знакомому ветеринару, он ее посмотрел и сразу назначил принимать Нуклеопептид. Обозначил необходимую дозировку и временной промежуток, в течение которого нужно было пить препарат.

После окончания курса лечения, Боня (так зовут мою собачку) окрепла, стала намного больше, резвей, теперь не успеваем с мужем ее кормить. В общем, препарат помог очень хорошо!»

2. «У моего пса появились странные высыпания на подбородке, которые он постоянно расчесывал. Сначала ветеринар посоветовал мазать специальной мазью, но ни к чему нормальному это не привело, аллергия как будто еще больше разразилась.

Перечитала много форумов для собаководов, что давать в этом случае, и наткнулась на Нуклеопептид. Много кто расхваливал его, ведь никаких побочных эффектов препарат не имеет.

Я проконсультировалась с врачом и, после его одобрения, начала колоть внутримышечно. Пес держался стойко, не скулил, как будто бы понимал, что это лечение. В течение месяца вся сыпь пропала.

Да помимо этого, еще и шерсть лезть перестала совсем, превратилась в гладкую и блестящую. Неплохой препарат. Всем советую!»

Ветеринар

«На протяжении всего времени работы очень часто использую Нуклеопептид. Очень хороший препарат, эффективность которого подтверждена клинически, в результате проводимых исследований.

Достоинством этого средства является не только его эффективность, но и природный состав. Ведь он сделан из селезенки рогатого скота, а она является основным органом иммунной системы.

Анна, ветеринар с 5-летним стажем.

Чем заменить или дополнить?

Самый популярный аналог Нуклеопептида — это Гамавит. Он обладает теми же свойствами, что и Нуклеопептид, а именно: укрепляет иммунитет, повышает выносливость и увеличивает массу тела животного. По цене эти препараты стоят примерно одинаково.

Очень часто собаководы боятся применять на своих любимцах новые препараты, опасаясь появления аллергии или иных тревожных последствий, но Гамавит, как и Нуклеопептид, не имеет никаких побочных эффектов.

Заключение

Применение Нуклеопептида сделает из вашего питомца прекрасного и большого представителя своей породы, улучшит его иммунитет, выносливость и сделает шёрстный покров более красивым и густым. Благодаря своему универсальному действию он подойдет не только взрослому животному, но и щенку, беременной, а также кормящей собаке.

Вконтакте

Технологии совершенствования живых организмов при помощи синтезированных пептидов и нуклеотидов работают на благо человечества в разных сферах с 1902 года. Они применяются в медицине, косметологии, сельском хозяйстве, включая ветеринарию. Результатом работы над задачей оздоровления и улучшения развития домашних животных, скота стал «Нуклеопептид». Инструкция по применению рекомендует его использовать как для мелких животных, так и для сельскохозяйственных поголовий.

Состав и свойства препарата

Что представляет собой «Нуклеопептид»? Инструкция по применению указывает на то, что он создан на основе вытяжки из внутренних органов (селезенки) быков. Благодаря синтетическим пептидным связям, он активирует иммунную и гормональную системы животного. Препарат выступает в роли адаптогена и биогенного стимулятора.

В составе лекарственного средства содержатся:

пептиды;
нуклеозиды;
основания нуклеотидов;
органические кислоты.

«Нуклеопептид» управляет процессами метаболизма в теле животного за счет того, что увеличивает до уровня физиологических пределов концентрацию андрогенных и тиреоидных гормонов. В результате приема препарата происходит стимуляция роста и развития организма животного, териоидный гормон оказывает мощное влияние на обмен веществ, усиливая регенеративные процессы, рост и дифференцировку тканей. Пептиды (короткие альфа-аминокислотные цепочки) оказывают регуляторное влияние на организм, тем самым проявляя оздоровительный эффект при аутоиммунных и хронических заболеваниях животного. За счет продуцирования интерферона повышается резистентность иммунной системы, устойчивость к воздействию токсичных и ядовитых веществ. Происходит улучшение состояния кожных и волосяных покровов.

Предназначение

Сферой применения препарата являются два направления: лечение животных в сельском хозяйстве и использование для домашних питомцев. Если со скотом все понятно, то для каких зверей, живущих у людей, в их домах и сараях, применяется «Нуклеопептид»? Инструкция по применению для собак и кошек содержит указание и в отношении остальных питомцев, например, птиц.

Форма выпуска

Что представляет собой препарат «Нуклеопептид» по внешнему виду? Это жидкость, цвет которой варьируется от светло-желтого до желтовато-коричневого. Если флакон встряхнуть, то она вспенится. На дно может выпасть осадок при отстаивании, однако его структура легко разбивается. Расфасовано средство в стеклянные флаконы различной вместимости. В продаже можно встретить раствор в ампулах по 5 или 10 мл и в бутылках по 100, 200 мл.

Как принимать домашним животным «Нуклеопептид»? Инструкция по применению для кошек, собак, то есть мелких питомцев, не вводит отличия от правил для крупного рогатого скота, в этом случае меняется только схема применения.

Дозировка

Для сельскохозяйственного поголовья актуальна следующая информация.


	Для идущих на откорм препарат вводят в первую треть шейного отдела.
	Вводят разовую дозу один раз в полмесяца. Курс два — три месяца. За 2 недели до убоя прекращают введение препарата. Более 50 мл за раз не вводят.
	Новорожденным ягнятам, телятам и поросятам препарат показан для повышения сопротивляемости организма.
	Применяют обычно разовую дозу в течение трех дней.
	Пушным зверькам для улучшения покровов, увеличения веса.
	Для молодняка: Один раз в день три первых дня; затем каждые полмесяца по разовой дозе течение периода всего роста.
	Для взрослого животного: Вводят каждые 5 дней по разовой дозе. Курс начинают за 30 — 45 дней до убоя.

Для домашних питомцев данные другие.

Объем раствора на килограмм веса	Схема
Порция лекарства за 1 раз 0,1 — 0,2 миллилитра	Для увеличения мышечной массы перед выставкой.
	Вводят разовую дозу на протяжении 3 — 5 дней подряд за месяц до выставки.
	Для роста и развития новорождённых щенков и котят, защиты от вирусных инфекций.
Дозировка в сутки для молодняка 2 — 3 мл, для особей постарше 5 — 10 мл.	Вводят коротким курсом в три дня перед кормлением.
Порция лекарства за 1 раз 0,1 — 0,2 миллилитра
Порция лекарства за 1 раз 0,1 — 0,2 миллилитра	1 раз в сутки в течение недели в сочетании с курсом лечения.
0,5 — 2 миллилитра	Птицам при недомоганиях, выпадении перьев.
0,5 — 2 миллилитра	Однократно в сутки, внутрь, на протяжении 3-5 дней.

Показания

Биопрепарат применяется:

Каких результатов ожидать от препарата «Нуклеопептид»? Инструкция по применению, отзывы подтверждают, что с его применением сроки откорма уменьшаются, увеличиваются почти до 25 % суточные привесы мышечной массы, улучшается качество шкурки у пушных зверей и сокращается падеж скота.

Противопоказания и побочные эффекты

Когда и почему нельзя назначать «Нуклеопептид»? Инструкция по применению указывает на следующие случаи:

когда имеется индивидуальная непереносимость лекарства;
во время проведения иммунизации;
острые инфекционные заболевания являются основанием для отсрочки;
периоды критического истощения организма.

Принимая во внимание, что в состав «Нуклеопептида» введены только натуральные природные компоненты, следует заметить, что он переносится животными легко, относится к малоопасным веществам. Однако он может вызвать нежелательную реакцию в виде аллергии и обострения имеющихся хронических заболеваний. Подобные побочные эффекты не являются основанием для отмены лечения препаратом.

Комбинирование в терапии, отзывы

Допустимо ли сочетать с другими лекарствами «Нуклеопептид»? Инструкция по применению для птиц, домашних животных и скота допускает его сочетание с химиотерапевтическими лекарственными средствами, витаминными и минеральными комплексами, а также медикаментами антибактериального спектра действия. По отзывам заводчиков, «Нуклеопептид» эффективно излечивает хронические свищи, раны, визуально улучшает качество шерсти.

Каких особые указания есть относительно приема препарата «Нуклеопептид»? Инструкция по применению напоминает, что его нельзя давать животным при наличии механических примесей или повреждении упаковки.

Нуклеопептид — ветеринарный препарат биологической природы. Его свойства позволяют нормализовать выработку гормонов и обменные процессы в организме животных. Давать питомцам Нуклеопептид просто. Противопоказаний у него практически нет. Нужно лишь придерживаться несложной инструкции и норм дозировки.

Описание и свойства препарата

Нуклеопептид — биологический иммуностимулятор, который:

помогает сформировать в организме животного работоспособный механизм противодействия вирусам и другим возбудителям заболеваний;
укрепляет здоровье печени и усиливает антитоксическую функцию этого органа;
улучшает усвояемость кормов;
увеличивает рост и вес животного;
повышает тонус организма, улучшает состояние кожи и шерсти;
усиливает терапевтический эффект при лечении хронических болезней.

Основа Нуклеопептида — экстракт из бычьей селезенки. В ней содержатся натуральные составляющие: пептиды, нуклеиновые и органические кислоты, другие биоактивные компоненты. Нуклеопептид выпускается в форме раствора для инъекций. Он выглядит как почти непрозрачная жидкость желто-коричневого окраса: ярче или бледнее.

Внимание! Состав действующих веществ в 1 мл раствора — не меньше 1 мг.

При встряхивании раствор вспенивается, а затем на несколько минут выпадает в рыхлый осадок. Производитель фасует Нуклеопептид в стеклянные баночки с резиновыми крышками и алюминиевыми фиксаторами герметичности. Объем — 5, 10, 100 или 200 мл. Флаконы с инструкцией по применению пакуют в картонные коробки. Также лекарство выпускают в ампулах по 1 мл.

Показания и противопоказания

Нуклеопептид назначают свиньям, жвачным и пушным животным, домашней птице, кошкам и собакам. Препарат помогает решить такие задачи:

Противопоказаний у Нуклеопептида минимум:

аллергическая реакция;
обострение хронического заболевания на первых этапах приема лекарства (позднее симптомы ослабевают).

Инструкция по применению запрещает давать Нуклеопептид во время острой фазы заболевания и сразу после вакцинации. Нежелательно лечить препаратом физически истощенных особей. Биостимулятор не конфликтует при одновременном приеме с другими химиотерапевтическими, антимикробными препаратами, витаминными добавками. Если планируется употребление мяса в пищу, остановите лечение Нуклеопептидом за 10 дней до убоя.

Хранить препарат следует строго в температурных рамках от +2 до +25оС, в темном и сухом месте. Нуклеопептид считается безопасным. Срок годности невскрытого флакона или ампулы — 24 месяца. После открытия лекарство нужно полностью использовать за одни сутки, это указано в инструкции по применению.

Внимание! Рыхлый осадок при встряхивании — норма. Если он уже не разбивается при взбалтывании, то раствор применять запрещено.

Животноводы положительно отзываются о препарате. Опытом установлено: использование Нуклеопептида в соответствии с инструкцией по применению увеличивает ежесуточную прибавку массы на 12-25%. Также уменьшается падеж скота, сроки откорма и себестоимость мяса снижаются, а внешний вид и здоровье питомцев становятся лучше.

А Вы использовали подобные препараты для своих животных?

Нуклеопептид: видео

инструкция по применению с дозировкой и отзывами. Можно ли давать его щенкам, перед прививкой или для профилактики?

Наши питомцы не меньше нас нуждаются в витаминах, укреплении иммунитета и защитных сил организма.

Можно ли?

Примерные болезни собак, когда необходимо давать Нуклеопептид:

отит;
дерматит;
экзема;
выпадение шерсти;
уменьшение в весе, истощение;
фурункулез;
токсикоз при беременности;
отставание в развитии роста;
различные кожные заболевания и воспаления;
интоксикация организма;
ослабленный иммунитет и др.

Инструкция по применению

Как давать?

Перед применением флакон с препаратом необходимо взболтать!

Дозировка

Рассмотрим самые распространенные причины для лечения Нуклеопептидом и дозировки.

Побочные эффекты

Не нужно применять препарат, если у животного повышенная температура и озноб.

Если срок годности раствора истек, то его необходимо выбросить, а не применять на своем животном.

Щенкам

Беременным и кормящим

Перед прививкой

Породные особенности

Отзывы

Собаководы

Ветеринар

Содержащиеся в ней вещества участвуют в образовании нуклеиновых кислот, из которых состоит ДНК, а пептиды выступают в роли “строительного материала”, способствуя росту и развитию организма».

Анна, ветеринар с 5-летним стажем.

Чем заменить или дополнить?

Заключение

Вконтакте

Facebook

Twitter

Одноклассники

Мой мир

Обработка нуклеопептидов, имитирующих ковалентный комплекс топоизомераза I – ДНК, тирозил-ДНК фосфодиэстеразой | Исследование нуклеиновых кислот

Аннотация

Тирозил-ДНК-фосфодиэстераза-1 (Tdp1) — единственный известный фермент для удаления тирозина из комплексов, в которых аминокислота связана с 3′-концом фрагментов ДНК. Такие комплексы могут быть получены после процессинга ДНК топоизомеразой I, и недавние исследования на дрожжах продемонстрировали важность TDP1 для выживания клеток после опосредованного топоизомеразой I повреждения ДНК.В настоящем исследовании мы использовали синтетические олигодезоксинуклеотид-пептидные конъюгаты (нуклеопептиды) и рекомбинантный дрожжевой Tdp1 для изучения молекулярных детерминант активности Tdp1. Мы обнаружили, что Tdp1 может обрабатывать нуклеопептиды, содержащие до 13 аминокислотных остатков, но малоактивен с 70 кДа фрагментом топоизомеразы I, ковалентно связанным с субстратом суицидной ДНК. Кроме того, Tdp1 более эффективен с нуклеопептидами, содержащими от одной до четырех аминокислот, чем с 15 аминокислотами. Tdp1 также был более эффективным с нуклеопептидами, содержащими 15 нуклеотидов, чем с гомологичными нуклеопептидами, содержащими 4 нуклеотида.Эти результаты предполагают, что связывание ДНК вносит вклад в активность Tdp1 и что Tdp1 будет наиболее эффективным после протеолиза топоизомеразы I in vivo .

Поступило 16.10.2001 г .; Изменено и принято 9 января 2002 г.

ВВЕДЕНИЕ

ДНК-топоизомераза I — это широко распространенный фермент, снимающий торсионное напряжение ДНК. Он активен во время транскрипции, репликации и изменений хроматина (1,2). Эукариотические и вирусные топоизомеразы I относятся к сайт-специфическим рекомбиназам (также называемым тирозиновыми рекомбиназами) (1,3,4).Они вводят временные однонитевые разрывы ДНК, образуя каталитический промежуточный продукт, в котором ковалентная связь образуется между остатком фермента тирозина (Tyr723 для топоизомеразы I человека) и 3′-концом разорванной ДНК (рис. 1А). После релаксации ДНК разрыв закрывается нуклеофильной атакой 5′-конца разорванной ДНК, высвобождая тем самым интактную топоизомеразу I, которая затем может выполнять дополнительные каталитические циклы (1,2).

Было показано, что ряд модификаций ДНК препятствует реакции религирования и генерирует необратимые комплексы топоизомераза I – ДНК, которые обычно называют «суицидными комплексами» (5).Эти модификации включают разрывы цепей ДНК (6-8), канцерогенные аддукты (9,10), несовпадения и базовые сайты (11). Противораковый препарат камптотецин и его клинически используемые производные также стабилизируют комплексы расщепления топоизомеразы I, и столкновение вилок репликации с этими обратимыми комплексами расщепления превращает комплексы расщепления в опосредованные репликацией двухцепочечные разрывы ДНК и ковалентные комплексы топоизомеразы I (12-15).

Недавно были обнаружены ферментативная активность (16) и продукт гена (17), функция которого заключается в селективном удалении 3′-фосфотирозильных аддуктов.Ген был назван тирозил-ДНК-фосфодиэстеразой-1 (TDP1), а ортологи были обнаружены у самых разных видов эукариот, включая дрожжевые и человеческие клетки (17). Tdp1 является членом суперсемейства фосфолипаз D (18). Нулевые мутанты TDP1 в почкующихся дрожжах Saccharomyces cerevisiae являются гиперчувствительными к мутантной топоизомеразе I, которая индуцирует высокие уровни комплексов расщепления (19), и к камптотецину в отсутствие Rad9 (17), что указывает на то, что Tdp1 действует для удаления топоизомеразы I. –ДНК комплексы.На рисунке 1B показаны реакции, проводимые Tdp1. Недавние биохимические исследования, проведенные с олигодезоксинуклеотидами, содержащими 3′-связанный тирозин, показали, что Tdp1 заметно более активен на субстратах, где ножничная связь (тирозил-ДНК) расположена в хвостовом дуплексе, а не в сегменте ДНК с разрывом дуплекса (19), который согласуется с возможностью того, что Tdp1 восстанавливает суицидные комплексы топоизомеразы I, такие как опосредованные репликацией двухцепочечные разрывы, генерируемые столкновениями репликационной вилки (15).

Целью настоящего исследования было дальнейшее определение биохимических требований для активности Tdp1 с использованием синтетических нуклеопептидов. Мы исследовали влияние размера полипептидной цепи и длины олигонуклеотида на активность Tdp1.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Fmoc-1-аминокислот и Boc-1-аминокислот (где Fmoc — 9-флуоренилметоксикарбонил, а Boc — t -бутоксикарбонил) и p -метилбензгидриламиновая смола были получены от Bachem (Бубендорф, Швейцария) и Novabiochem (Бад Зоден, Германия).Boc-Thr (Ac) -OH (где Ac представляет собой ацетил) и Boc-Arg (Fmoc) ₂ -OH получали, как описано ранее (20). 3′-фосфорамидитные производные 4,4′-диметокситритил (DMT) -dA ^Bz (где Bz представляет собой бензоил), DMT-dC ^Bz, DMT-dG ^iBu (где iBu представляет собой изобутирил) и DMT- T были приобретены у Glen Research Corp. (Стерлинг, Вирджиния). Твердофазный синтез выполняли вручную в полипропиленовом шприце, снабженном полиэтиленовым диском (пептиды) или в синтезаторе 380B Applied Biosystems (олигонуклеотидные фрагменты).Анализы с обращенно-фазовой ВЭЖХ и очистки выполнялись либо на колонке Nucleosil C18 (250 × 4,6 мм, 10 мкм, 1 мл / мин), либо на колонке Kromasil C18 (250 × 10 мм, 10 мкм, 3 мл / мин) с использованием линейной градиент 0,01 М водного раствора ацетата аммония и ацетонитрила (ACN) / H ₂ O (1: 1). Смолу октадецилоксан-Vydac использовали для очистки методом MPLC с обращенной фазой. Электрофорез проводили в денатурирующих условиях (7 М мочевина) в 20% полиакриламидных гелях при 500–750 В в течение 3–4 ч. В аналитическом масштабе нуклеопептиды были обнаружены реакцией с красителем Stains-all (Sigma, St Louis, MO).В препаративных гелях продукты визуализировали УФ-затенением и выделяли методом измельчения и замачивания (21). Целевые продукты обессоливали элюированием через картриджи Sep-Pak (Phase Separations Ltd, Флинтшир, Великобритания). Аминокислотные анализы выполняли на анализаторе Beckman System 6300 (Fullerton, CA). Гидролиз пептидных смол проводили в 12 M HCl / пропионовой кислоте (1: 1) либо при 150 ° C в течение 60–90 минут, либо при 110 ° C в течение 24 часов (серин и треонин в некоторых условиях разлагаются в этих условиях гидролиза. ; кристалл фенола был добавлен для уменьшения разложения тирозина; аспарагин и глутамин превращаются в аспарагиновую и глутаминовую кислоты соответственно).Расщепление фосфодиэстеразой змеиного яда (EC 3.1.4.1; Sigma) и щелочной фосфатазой (EC 3.1.3.1; Sigma) проводили на 0,5–1,0 OD ₂₆₀ единиц нуклеопептидов. Смеси для переваривания анализировали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (10 мин, 5% B, линейный градиент от 5 до 30% B за 10 мин). Матричный масс-спектрометрический анализ с использованием лазерной десорбции, ионизации и времени пролета (MALDI-TOF) проводили с использованием прибора Voyager-DE RP (Perseptive Biosystems, Foster City, CA). Расчетные значения массы нейтральных соединений (M) указаны во всех случаях.Синтетические олигонуклеотиды и 3′-тирозил-олигонуклеотид H-Tyr (p3′-dTTTCAGAAAATCTAG) -OH (N15Y) были приобретены у Midland Certified Reagents Co. (Midland, TX). Очищенную топоизомеразу человека получали, как описано ранее (22). Saccharomyces cerevisiae Tdp1 бактериально экспрессировался в виде N-концевого слияния с гист-меткой, как описано (15). Белок Tdp1 очищали с помощью набора для очистки Novagen His-Bind в соответствии с инструкциями (Novagen, Madison, WI).

Получение нуклеопептидов

Включение внутренней эталонной аминокислоты (лейцин или фенилаланин) в p -метилбензгидриламиновую смолу ( f = 0.5–0,6 ммоль / г) проводили реакцией с 0,5 эквивалентами как производного Fmoc-аминокислоты, так и N , N ‘ -дициклогексилкарбодиимида (DCC) (15 мин) для достижения частичного ацилирования полимерного амина. группы. Степень замещения определяли на аликвоте с помощью УФ-спектрофотометрического количественного определения количества N — (9-флуоренилметил) пиперидина, образовавшегося при снятии защиты пиперидином, и, если это подходит для синтеза олигонуклеотидов (23), непрореагировавшие аминогруппы блокировали реакцией с Ас ₂ O и N -этил- N , N -диизопропиламин (DIEA) (значения степени замещения варьировались от 0.От 17 до 0,19 ммоль / г). Группа Fmoc была удалена, и бифункциональный линкер N -2- (9-гидроксиметилфлуоренил) янтарная кислота (24,25) был присоединен в присутствии DCC (3 эквивалента каждого реагента, 2–4 часа). Гидроксильные группы этерифицировали реакцией с C-концевой Boc-аминокислотой и DCC (10 экв.) В присутствии 0,5 экв. 4-N, N-диметиламинопиридина в течение 2 часов. Выход связывания определяли по относительному соотношению [C-концевой остаток] / [внутренняя эталонная аминокислота] после кислотного гидролиза и аминокислотного анализа (типичные значения 0.91–0.95), а непрореагировавшие гидроксильные группы блокировали реакцией с уксусным ангидридом и пиридином.

Остальные аминокислоты пептидной последовательности были включены в соответствии со стандартными процедурами твердофазной сборки пептидов (удаление Boc дважды реакцией с 30% трифторуксусной кислотой в дихлорметане в течение 15 минут, нейтрализация 5% DIEA в дихлорметане в течение 3 + 7 минут и сочетание с 3 эквив. Boc-аминокислотой и DCC в течение 1–1,5 ч) с добавлением эквимолярного количества 1-гидроксибензотриазола с включением производного аргинина.Чтобы предотвратить образование дикетопиперазина, Boc-группу смолы Boc-Asp (OFm) -Pro (где Fm представляет собой 9-флуоренилметил) удаляли, как обычно, и Boc-лейцин (5 экв.) Вводили в трифторацетатную соль дипептидной смолы по реакции с 7-азабензотриазол-1-илокситрис (пирролидино) фосфоний-гексафторфосфатом (5 экв.) и DIEA (10 экв.). При необходимости ацилирование N-концевой аминогруппы проводили реакцией с уксусным ангидридом, в противном случае N-концевую аминокислоту вводили как производное Fmoc.

Удлинение олигонуклеотидов на тирозиновой боковой цепи пептидных смол (20) проводили в соответствии со стандартными процедурами на основе триэфиров фосфита с небольшими модификациями, которые делают эту методику совместимой с использованием полистирольных носителей (23). Аликвоты 0,2 М растворов коммерчески доступных производных 3′-фосфорамидита [5′-DMT-N-P (OCNE) NiPr ₂, N = T, A ^Bz, C ^Bz или G ^iBu; где CNE представляет собой 2-цианоэтил] в безводном дихлорметане и 0.Для стадии сочетания (15 мин) использовали 8 М растворы тетразола в безводном тетрагидрофуране. Окисление фосфита в фосфат осуществлялось обработкой 1 М т -BuOOH. Выходы связывания для включения первого производного нуклеозида обычно находятся в диапазоне от 90 до 99%, а средний выход связывания составляет 97-98%. Группа 5′-DMT была удалена из нуклеопептидной смолы.

Нуклеопептиды снимали с защиты и отделяли от твердого носителя обработкой в течение ночи концентрированным водным раствором аммиака / диоксана (1: 1) при 55 ° C.

H-Ile-Ala-Leu-Gly-Thr-Ser-Lys-Leu-Asn-Tyr (p ^{3 ‘} -dTTTCAGAAAATCTAG) -Leu-Asp-Pro-OH (N15P13). Аминокислота внутреннего эталона: Phe. Аминокислотный анализ пептидной смолы: Asp 2,15, Thr 0,65, Ser 0,33, Gly 0,87, Ala 0,95, Ile 0,60, Leu 1,97, Tyr 1,09, Lys 1,02, Pro 1,04. Очистка: препаративный электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE) и обращенно-фазовая ВЭЖХ, линейный градиент от 5 до 35% B в течение 30 минут. Нуклеозидный состав: dC 3,05, dG 2,04, dT 4.23, дА 5,77. Расчетная масса (M): 6038,54; Масс-спектрометрия MALDI-TOF (MALDI-TOF MS) [отрицательный режим, линейный, тригидроксиацетофенон (THAP)]: m / z 6036,3, [M-H] ^—.

Ac-Tyr (p ³ ′ -dTTTCAGAAAATCTAG) -Ala-Phe-Gly-OH (N15P4). Аминокислота внутреннего эталона: Leu. Аминокислотный анализ пептидной смолы: Gly 1,02, Ala 0,99, Tyr 1,00, Phe 0,99. Очистка: препаративная СТРАНИЦА. Нуклеозидный состав: dC 2.43, dG 1,92, dT 4,87, dA 5,78. Расчетная масса (M): 5132,99; MALDI-TOF MS (отрицательный режим, линейный, THAP): м / z 5135,1, [M-H] ^—.

H-Иль-Ала-Лей-Гли-Тре-Сер-Лиз-Лей-Асн-Тир (p ^{3 ‘} -dACGT) -Леу-Асп-Про-ОН (N4P13). Аминокислота внутреннего эталона: Phe. Аминокислотный анализ пептидной смолы: Asp 2,15, Thr 0,65, Ser 0,33, Gly 0,87, Ala 0,95, Ile 0,60, Leu 1,97, Tyr 1,09, Lys 1,02, Pro 1,04. Очистка: обращенно-фазовая ВЭЖХ, линейный градиент от 5 до 35% В за 30 мин.Нуклеозидный состав: dC 1,25, dG 1,19, dT 1,06, dA 0,51. Расчетная масса (M): 2638,97; MALDI-TOF MS (отрицательная мода, рефлектрон, THAP): м / z 2639,1, [M-H] ^—.

Ac-Tyr (p3 ′ -dACGT) -Ala-Phe-Gly-OH (N4P4). Аминокислота внутреннего эталона: Leu. Аминокислотный анализ пептидной смолы: Gly 1,02, Ala 0,99, Tyr 1,00, Phe 0,99. Очистка: обращенно-фазовая (C18, Vydac) жидкостная хроматография среднего давления, A = 0,05 M ацетат аммония, B = ACN / H ₂ O (1: 1), градиент от 0 до 30% B, 600 мл каждого растворителя.Нуклеозидный состав: dC 0,99, dG 1,08, dT 0,97, dA 0,96. Расчетная масса (M): 1733,41; MALDI-TOF MS (отрицательная мода, рефлектрон, THAP): м / z 1732,8, [M-H] ^—.

Ac-Tyr (p3 ′ -dTTTCAGAAAATCTAG) -Leu-Asp-Pro-Arg-Ile-Thr-Val-OH (N15R8). Аминокислота внутреннего эталона: Phe. Аминокислотный анализ пептидной смолы: Asp 1,00, Thr 0,39, Val 1,65, Ile 0,82, Leu 1,01, Tyr 0,99, Arg 1,06, Pro 0,84. Очистка: препаративная СТРАНИЦА. Нуклеозидный состав: dC 2.12, dG 2,05, dT 4,95, dA 5,92. Расчетная масса (M): 5652,32; MALDI-TOF MS (отрицательная мода, линейная, THAP): м / z 5651,6, [M-H] ^—.

Радиоактивная мечение олигонуклеотидов и нуклеопептидов

Олигонуклеотидов и нуклеопептидов метили на 5′-конце с использованием [γ- ³² P] АТФ и полинуклеотидкиназы Т4 (T4 PKP). Обычно 20 мкл реакционной смеси, содержащей 60 мкКи [γH ³² P] АТФ (6000 Ки / ммоль; DuPont NEN, Бостон, Массачусетс), 5 ед. Полинуклеотидкиназы Т4 (Gibco BRL, Роквилл, штат Мэриленд), 10 пмоль олигонуклеотида или нуклеопептид, 70 мМ Трис-HCl, pH 7.6, 10 мМ MgCl ₂, 100 мМ KCl, 1 мМ 2-меркаптоэтанол инкубировали при 37 ° C в течение 1 ч, добавляли 1 мкл 0,5 М этилендиаминотетрауксусной кислоты (EDTA) и смесь нагревали до 70 ° C в течение 10 минут. мин и прошел над колонкой QuickSpin G-25 (Boehringer Mannheim, Мангейм, Германия).

Tdp1 реакции

Обычно 12 мкл реакционных смесей, содержащих 1 пмоль 5′- ³² P-нуклеопептид, 11 нг Tdp1, 50 мМ трис-HCl, pH 8,0, 80 мМ KCl, 2 мМ EDTA, 1 мМ дитиотрейтол (DTT), 40 мкг / мл бычьего сывороточного альбумина (BSA) инкубировали при 30 ° C в течение 12 мин.Реакции останавливали добавлением 36 мкл загрузочного буфера Maxam-Gilbert (80% об. Формамида, 10 мМ NaOH, 1 мМ EDTA, 1% мас. / Об. Ксилолцианола, 1% мас. / Об. Бромфенолового синего). Контрольные образцы олигонуклеотидов или нуклеопептидов были приготовлены таким же образом, за исключением того, что Tdp1 был заменен равным объемом буфера для разведения для Tdp1 (50 мМ Tris – HCl, pH 8,0, 100 мМ NaCl, 5 мМ Na ₂ EDTA, 5 мМ ДТТ, 10% глицерин, 500 мкг / мл БСА).

Кинетика реакции Tdp1 во времени

Для каждого субстрата готовили 12 мкл реакционной смеси, как описано выше, и инкубировали при 30 ° C.Время t = 0 определяли как момент добавления фермента Tdp1 в смесь. Аликвоты по 1,5 мкл отбирали через 0,33, 0,67, 1, 3, 5, 10 и 30 мин, и реакции останавливали добавлением 4,3 мкл загрузочного буфера Максама-Гилберта.

Определение кинетических параметров Михаэлиса – Ментен

Для каждого субстрата 0,25 пмоль радиоактивно меченного материала смешивали с 0, 2, 10, 20 и 35 пмоль немеченого материала с получением 6 мкл реакционных смесей с конечной концентрацией субстрата 0.042, 1,71, 3,38 и 5,88 мкМ соответственно. После инкубации с 5,5 нг Tdp1 при 30 ° C в течение 1 мин (N15P4 и N15Y), 3 мин (N15P13 и N4P4) или 6 мин (N4P13) отбирали аликвоты по 1,5 мкл и реакцию останавливали с помощью 4,3 мкл загрузки Максама – Гилберта. буфер. Для каждого субстрата эксперименты были выполнены независимо три раза, и полученные данные были подогнаны к приближению Бриггса – Холдейна уравнения Михаэлиса – Ментен и представлены в виде графика Лайнуивера – Берка, или двойного обратного графика, для получения оценок константы Михаэлиса K _м и максимальная скорость В _макс (26,27).Значение V _max было преобразовано в каталитическую константу или число оборотов k _cat путем деления на концентрацию фермента, использованного в экспериментах (14,72 нМ). Также была рассчитана константа специфичности k _cat/ K _m. Во всех случаях рассчитывали стандартное отклонение.

Приготовление суицидного комплекса топоизомеразы I – 14мер

18-мерный олигонуклеотид был помечен на 5′-конце, как описано ранее, и гибридизирован с комплементарной 36-мерной цепью (11).Затем 5′-ОН конец нижней 36-членной цепи был фосфорилирован, чтобы избежать его рекомбинации с верхней 3′-ОН цепью (28). Ковалентный комплекс топоизомераза I-ДНК был образован, как описано (11), в реакционной смеси, содержащей 50 фмоль ДНК-дуплекса, 5 нг очищенной топоизомеразы I человека, 10 мМ Трис-HCl, pH 7,5, 50 мМ KCl, 5 мМ MgCl ₂, 0,1 мМ EDTA, 0,2 мМ DTT и 15 мкг / мл BSA, и смесь инкубировали при 25 ° C в течение 2 часов.

Реакции дефосфорилирования с фосфатазой полинуклеотидкиназы Т4 (T4 PNKP)

После инкубации с Tdp1 реакционные смеси доводили до 10 мМ MgCl ₂, добавляли 15 ед. T4 PNKP и инкубировали при 37 ° C в течение 20 мин.Реакции останавливали добавлением 36 мкл загрузочного буфера Максама – Гилберта.

Анализ гель-электрофорезом

Образцы реакции (обычно 5 мкл) анализировали электрофорезом в 20% полиакриламидных гелях, содержащих 7,0 М мочевины в буфере трисборная кислота-ЭДТА (K · D Medical Inc., Колумбия, Мэриленд) на специальном секвенаторе высоты (52 × 33 см) от CBS Scientific (Дель Мар, Калифорния). Авторадиографы сканировали с помощью фосфорного сканера от Molecular Dynamics (Саннивейл, Калифорния), чтобы количественно оценить интенсивность каждой полосы.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Распознавание нуклеопептидов как субстратов Tdp1 и определение структуры продукта реакции

Чтобы получить некоторое представление о структурных предпочтениях Tdp1, мы синтезировали нуклеопептиды, имитирующие ковалентный комплекс топоизомераза I-ДНК, с фосфодиэфирными связями между гидроксильной группой боковой цепи остатка тирозина и 3′-концом олигонуклеотидной цепи (рис. . 2).Нуклеопептидные последовательности объединяют пептиды и олигонуклеотиды разной длины и состава. Аминокислотная последовательность топоизомеразы I вокруг каталитического остатка тирозина (Tyr723 для топоизомеразы 1 человека) воспроизводится в нуклеопептидах с пептидными цепями P13 и R8 (13). Олигонуклеотидный фрагмент N15 происходит из фрагмента ДНК, который остается связанным с белком после реакции расщепления (10,11,28).

Чтобы оценить, могут ли нуклеопептиды процессироваться Tdp1, в первой серии экспериментов ближайшие модели ковалентных комплексов, нуклеопептиды N15P13 и N15R8, инкубировали с ферментом, а аликвоты реакционных смесей анализировали с помощью гель-электрофореза.Как показано на Фигуре 3 (дорожки 3 и 6), обработка обоих нуклеопептидов Tdp1 давала общий и уникальный продукт с немного более высокой электрофоретической подвижностью, чем контрольный 15-мерный олигонуклеотид, что позволяет предположить, что продукт был 3′-фосфорилированным олигонуклеотидом. Эта интерпретация подтверждается тем фактом, что, когда за реакциями Tdp1 следовала обработка T4 PNKP (фиг. 3, дорожки 4 и 7), продукты совпадали с контрольным 15-мером.

Активность фосфодиэстеразы дополнительно оценивали с помощью N15P13.Было обнаружено, что 95% N15P13 трансформировалось в соответствующий 3′-фосфорилированный олигонуклеотид после инкубации с 11 нг Tdp1 при 30 ° C в течение 30 минут, но активность фосфодиэстеразы сохранялась при более низких концентрациях фермента. Таким образом, при использовании 2,2 нг, 440 и 73 пг Tdp1 мы наблюдали трансформацию 83, 44 и 8% N15P13 соответственно. В последующих экспериментах мы неизменно использовали 11 нг Tdp1 на мкмоль субстрата.

Динамика кинетики процессинга нуклеопептида Tdp1

Для изучения детерминант реакции тирозин-фосфатного расщепления, в частности влияния размера пептидных и олигонуклеотидных фрагментов на распознавание и процессинг ферментом, мы провели динамическое кинетическое исследование гидролиза нуклеопептидов N15P13, N15P4, N4P13, N4P4 и N15Y от Tdp1.Анализ относительной интенсивности полос субстрата и продукта позволил графически представить процент обработки как функцию времени для каждого полученного субстрата (рис. 4).

Мы наблюдали общую тенденцию в поведении фермента в зависимости от структуры субстрата. Обработка Tdp1 оказалась наиболее эффективной с субстратами, состоящими из длинных олигонуклеотидов и коротких пептидов, как следует из относительного процента гидролизованного нуклеопептида. N15P13 обрабатывался лучше, чем N4P13, а N15P4 обрабатывался лучше, чем N4P4, когда длина пептида поддерживалась постоянной.С другой стороны, когда длина олигонуклеотида поддерживалась постоянной, N15P4 обрабатывался лучше, чем N15P13, и N4P4 обрабатывался лучше, чем N4P13. Таким образом, ранжирование четырех нуклеопептидов по эффективности реакции с Tdp1 будет следующим: N15P4> N15P13 ≈ N4P4> N4P13. Процессинг нуклеопептидов N15P13 и N4P4, вероятно, был сходным из-за компенсации влияний олигонуклеотидного и пептидного фрагментов соответственно. Продукты с 15-членным олигонуклеотидом и самыми короткими пептидами (нуклеопептид N15P4 и 3′-тирозин-олигонуклеотид N15Y), по-видимому, имели очень похожее поведение.

Для подтверждения наблюдаемых ранее качественных тенденций были определены параметры Михаэлиса – Ментен реакций Tdp1 – нуклеопептид (таблица 1). Константа Михаэлиса K _m — это концентрация субстрата, при которой скорость полумаксимальна. K _m не указывает, насколько сильно субстрат связывается с активным сайтом фермента, но может быть связано со способностью фермента распознавать субстрат. В нашем случае значения K _m, наблюдаемые для различных подложек, дали следующее: N15P4 K _m, чем нуклеопептиды, содержащие короткие олигонуклеотиды, что указывает на то, что олигонуклеотидный фрагмент может помочь Tdp1 в распознавании подходящего субстрата. Это наблюдение подтверждает предпочтение длинных олигонуклеотидсодержащих субстратов, наблюдаемое во временной кинетике, и предполагает присутствие олигонуклеотидсвязывающего сайта на ферменте.

В наших экспериментах концентрация фермента была одинаковой для всех субстратов, и, как следствие, максимальная скорость V _max была прямо пропорциональна каталитической константе или числу оборотов, k _cat ( см. Материалы и методы). k _cat — максимальное количество молекул субстрата, которое может быть преобразовано в продукт за секунду на активный сайт. Поскольку максимальная скорость достигается при высоких концентрациях субстрата, когда все активные центры заняты субстратом, k _cat является мерой того, насколько быстро фермент может работать после заполнения активного сайта. Значения k _cat, определенные для различных подложек, были следующими: N4P13 k _cat будет значительной, это будет означать, что минимальный размер пептидного фрагмента является требованием для эффективного действия фермента либо на стадии распознавания, либо на стадии процессинга.В любом случае влияние таких факторов, как аминокислотный состав и структурные свойства, не может быть исключено на основании настоящих доказательств.

Абсолютные значения k _cat, наблюдаемые для этого типа субстрата (0,08–1,0 молекулы в секунду), кажутся довольно маленькими по сравнению со значениями, описанными для других ферментов, таких как ацетилхолинэстераза ( k _cat = 14 000) и химотрипсин ( k _cat = 100) (27,29), например.Тем не менее, следует учесть два момента. С одной стороны, мы определили кинетические параметры синтетических субстратов, воспроизводящих ковалентные комплексы топоизомераза I – ДНК, а не кинетические параметры нативных комплексов в клеточной среде, которые могут быть разными. С другой стороны, небольшие значения k _cat не обязательно противоречат эффективному действию фермента в клетке, поскольку можно ожидать, что Tdp1 будет обрабатывать тупиковые комплексы топоизомераза I-ДНК, позволяя рециркулировать ДНК без вмешиваясь в нормальный каталитический цикл топоизомеразы.

Наконец, мы вычислили соотношение k _cat/ K _m, которое называется константой специфичности и позволяет оценить, насколько быстро фермент может работать при низких концентрациях субстрата. Эта константа дает вполне реалистичное описание эффективности фермента, поскольку в физиологических условиях ферменты обычно не работают при насыщающих концентрациях. В нашем случае значения k _cat/ K _m, наблюдаемые для различных подложек, дали следующую классификацию: N4P13

Процессинг суицидного комплекса топоизомераза I – 14мер с помощью Tdp1

Помимо использования нуклеопептидов в качестве инструмента для оценки предпочтений Tdp1, мы рассмотрели возможность изучения процессинга суицидного комплекса, состоящего из топоизомеразы I человека, ковалентно связанной с 14-мерным олигонуклеотидом (рис.5A и B) (11,22,28). Для этих экспериментов мы использовали полипептид топоизомеразы I 68 кДа, усеченный на своем N-конце и очищенный от клеток насекомых, инфицированных бакуловирусной конструкцией (22). Как и в случае с нуклеопептидами, мы обрабатывали суицидный комплекс топоизомеразы I-14-мер с Tdp1 и отбирали аликвоты в разное время. Наблюдалось постепенное появление новой полосы, соответствующей высвобожденному 3′-фосфорилированному 14-мерному олигонуклеотиду (фиг. 5C). Полосы соответствовали ожидаемым 3′-фосфатным 14-мерным одноцепочечным продуктам, поскольку мы проводили электрофорез в денатурирующих условиях, чтобы избежать возможных явлений агрегации типа белок-белок или белок-нуклеиновая кислота.Относительная интенсивность 14-мерных полос позволила нам сделать вывод, что через 30 мин Tdp1 обработал только ~ 9% суицидного комплекса (рис. 5D). Этот результат подтверждает сложность Tdp1 при обработке субстратов длинными пептидами и короткими олигонуклеотидами. Суицидный комплекс можно рассматривать как крайний случай нуклеопептида с очень длинным пептидным фрагментом, полипептидом топоизомеразы I и относительно коротким олигонуклеотидом. В геле мы также наблюдали неизменную полосу, соответствующую избытку исходного 18-членного олигонуклеотида, а также полосы, соответствующие делеционным 17, 16, 15 и 14-мерным олигонуклеотидам, которые сопровождали 18-член, использованный в этом эксперименте.Низкая активность Tdp1 против суицидного субстрата топоизомеразы I контрастирует с эффективностью Tdp1 для фрагментов ДНК, связанных с короткими пептидами, что предполагает, что Tdp1 действует после процессинга ковалентного комплекса топоизомеразы I in vivo (14). Соответственно, протеолиз топоизомеразы I наблюдался в клетках, обработанных камптотецином (30), и коррелировал с клеточной устойчивостью (31). Обрабатывает ли PNKP дальше концы ДНК, возникающие в результате действия Tdp1, остается неизвестным.Наше недавнее наблюдение, что 5′-гидроксильные концы опосредованных репликацией разрывов ДНК, продуцируемых камптотецином в клетках карциномы толстой кишки человека, становятся 5′-фосфорилированными in vivo (15), согласуется с этой гипотезой (схематически изображенной на рис. 1B).

БЛАГОДАРНОСТИ

Мы хотим поблагодарить докторов Джеффри Дж. Пулио и Ховарда Нэша (LMB, NIMH) за предоставленные нам дрожжи Tdp1 и ценные советы. Эта работа была поддержана фондами испанского MEC (грант PB97-0941-C02-01) и Generalitat de Catalunya (1998SGR-1, 2000SGR-18 и Centre de Referència de Biotecnologia).Лоран Дебетюн был стипендиатом Женералитата Каталонии.

Фигура 1. Схематическое изображение промежуточных продуктов расщепления топоизомеразы I и процессинга с помощью Tdp1 и PNKP. ( A ) Комплекс обратимого расщепления топоизомеразой I (top1). ( B ) Tdp1 гидролизует фосфотирозильную связь. Полученный разрыв ДНК несет 3′-фосфат и 5′-гидроксил. PNKP (например, T4 PNKP) имеет две активности: удаление фосфата на 3′-конце и фосфорилирование 5′-конца.

Рисунок 1. Схематическое изображение промежуточных продуктов расщепления топоизомеразы I и процессинга с помощью Tdp1 и PNKP. ( A ) Комплекс обратимого расщепления топоизомеразой I (top1). ( B ) Tdp1 гидролизует фосфотирозильную связь. Полученный разрыв ДНК несет 3′-фосфат и 5′-гидроксил. PNKP (например, T4 PNKP) имеет две активности: удаление фосфата на 3′-конце и фосфорилирование 5′-конца.

Рисунок 2. Нуклеопептиды, используемые в качестве субстратов Tdp1.(Вставка) Структура тирозил-3′-нуклеозидной фосфодиэфирной связи в нуклеопептидах.

Рисунок 2. Нуклеопептиды, используемые в качестве субстратов Tdp1. (Вставка) Структура тирозил-3′-нуклеозидной фосфодиэфирной связи в нуклеопептидах.

Рисунок 3. Реакция Tdp1 с нуклеопептидами N15P13 и N15R8. Контроли: 15-мерный олигонуклеотид (дорожки 1 и 8) и нуклеопептиды N15P13 (дорожка 2) и N15R8 (дорожка 5). Все продукты были радиоактивно мечены 5′- ³² P.Инкубация 1 пмоль нуклеопептида с 11 нг Tdp1 при 30 ° C в течение 30 минут с последующей реакцией с 15 U T4 PNKP при 37 ° C в течение 20 минут давала 15-мерные олигонуклеотиды N15P13 (дорожка 4) и N15R8 (дорожка 7), тогда как реакция N15P13 и N15R8 (1 пмоль) с Tdp1 (11 нг) приводила к образованию продукта с несколько более высокой подвижностью (дорожки 3 и 6 соответственно). В результате расщепление нуклеопептидов Tdp1 генерирует соответствующий 3′-фосфатный олигонуклеотид, а обработка T4 PNKP удаляет 3′-концевой фосфат.

Рисунок 3. Реакция Tdp1 с нуклеопептидами N15P13 и N15R8. Контроли: 15-мерный олигонуклеотид (дорожки 1 и 8) и нуклеопептиды N15P13 (дорожка 2) и N15R8 (дорожка 5). Все продукты были радиоактивно мечены 5′- ³² P. Инкубация 1 пмоль нуклеопептида с 11 нг Tdp1 при 30 ° C в течение 30 минут с последующей реакцией с 15 U T4 PNKP при 37 ° C в течение 20 минут давала 15-мерные олигонуклеотиды N15P13 (дорожка 4) и N15R8 (дорожка 7), тогда как реакция N15P13 и N15R8 (1 пмоль) с Tdp1 (11 нг) приводила к образованию продукта с несколько более высокой подвижностью (дорожки 3 и 6 соответственно).В результате расщепление нуклеопептидов Tdp1 генерирует соответствующий 3′-фосфатный олигонуклеотид, а обработка T4 PNKP удаляет 3′-концевой фосфат.

Фигура 4. Кинетика процессинга Tdp1 нуклеопептидов N15P13, N15P4, N4P13, N4P4 и N15Y. ( A ) Аликвоту 1 пмоль каждого нуклеопептида (5′- ³² Р-меченого) инкубировали при 30 ° C с 11 нг Tdp1. Аликвоты отбирали через 0,33, 0,67, 1, 3, 5, 10 и 30 мин и после добавления 3-кратного избытка загрузочного буфера Максама-Гилберта для остановки реакции смеси анализировали гель-электрофорезом.( B ) Представление процента расщепления Tdp1 как функции времени.

Рисунок 4. Кинетика процессинга Tdp1 нуклеопептидов N15P13, N15P4, N4P13, N4P4 и N15Y. ( A ) Аликвоту 1 пмоль каждого нуклеопептида (5′- ³² Р-меченого) инкубировали при 30 ° C с 11 нг Tdp1. Аликвоты отбирали через 0,33, 0,67, 1, 3, 5, 10 и 30 мин и после добавления 3-кратного избытка загрузочного буфера Максама-Гилберта для остановки реакции смеси анализировали гель-электрофорезом.( B ) Представление процента расщепления Tdp1 как функции времени.

Рис. 5. Структура дуплекса ДНК, используемого в качестве субстрата для ( A ) человеческой топоизомеразы I и ( B ) суицидного комплекса топоизомеразы I – 14-мерного олигонуклеотида. Обработка Tdp1 суицидного комплекса топоизомеразы I – 14-мерного олигонуклеотида: ( C ) анализ PAGE и ( D ) графическое представление процессинга суицидного комплекса как функции времени.

± 0,23 ± 0,23 0,074 ± 0,011

Подложка	V _макс (мкМ с ^–1)	K _м (мкМ)	k _{cat0 (мин. k _cat/ K _m (мкМ ^–1 мин ^–1)}
N15P13	0.222 ± 0,060	0,71 ± 0,24	15,08 ± 4,09	21,66 ± 1,40
N15P4	0,814 ± 0,082	0,61 ± 0,23	55,27 ± 5,57	55,27 ± 5,57	1,39 ± 0,39	5,06 ± 0,76	3,95 ± 1,77
N4P4	0,319 ± 0,092	1,67 ± 0,84	21,67 ± 6,30	13.97 ± 3,64
N15Y	0,670 ± 0,141	0,97 ± 0,19	45,53 ± 9,58	55,85 ± 21,22

± 0,23 ± 0,23 0,074 ± 0,011

900 µs (9) 1 )	K _m (мкМ)	k _cat (min ^–1)	k _cat/ K _m (мкM ^–1 min ^–1)
N15P13	0.222 ± 0,060	0,71 ± 0,24	15,08 ± 4,09	21,66 ± 1,40
N15P4	0,814 ± 0,082	0,61 ± 0,23	55,27 ± 5,57	55,27 ± 5,57	1,39 ± 0,39	5,06 ± 0,76	3,95 ± 1,77
N4P4	0,319 ± 0,092	1,67 ± 0,84	21,67 ± 6,30	13.97 ± 3,64
N15Y	0,670 ± 0,141	0,97 ± 0,19	45,53 ± 9,58	55,85 ± 21,22

± 0,23 ± 0,23 0,074 ± 0,011

900 µs (9) 1 )	K _m (мкМ)	k _cat (min ^–1)	k _cat/ K _m (мкM ^–1 min ^–1)
N15P13	0.222 ± 0,060	0,71 ± 0,24	15,08 ± 4,09	21,66 ± 1,40
N15P4	0,814 ± 0,082	0,61 ± 0,23	55,27 ± 5,57	55,27 ± 5,57	1,39 ± 0,39	5,06 ± 0,76	3,95 ± 1,77
N4P4	0,319 ± 0,092	1,67 ± 0,84	21,67 ± 6,30	13.97 ± 3,64
N15Y	0,670 ± 0,141	0,97 ± 0,19	45,53 ± 9,58	55,85 ± 21,22

± 0,23 ± 0,23 0,074 ± 0,011

900 µs (9) 1 )	K _m (мкМ)	k _cat (min ^–1)	k _cat/ K _m (мкM ^–1 min ^–1)
N15P13	0.222 ± 0,060	0,71 ± 0,24	15,08 ± 4,09	21,66 ± 1,40
N15P4	0,814 ± 0,082	0,61 ± 0,23	55,27 ± 5,57	55,27 ± 5,57	1,39 ± 0,39	5,06 ± 0,76	3,95 ± 1,77
N4P4	0,319 ± 0,092	1,67 ± 0,84	21,67 ± 6,30	13.97 ± 3,64
N15Y	0,670 ± 0,141	0,97 ± 0,19	45,53 ± 9,58	55,85 ± 21,22

Литература

Wang, J.C. (

1996

) ДНК-топоизомеразы.

Annu. Rev. Biochem.

635

–692.2.

Шампу, Ж.Дж. (

2001

) Топоизомеразы ДНК: структура, функция и механизм.

Annu. Rev. Biochem.

369

–413.3.

Уигли, Д. (

1998

) Учить новую собаку старым трюкам?

Curr. Биол.

543

–548.4.

Cheng, C., Kussie, P., Pavletich, N. и Шуман, С. (

1998

) Сохранение структуры и механизма между эукариотической топоизомеразой I и сайт-специфическими рекомбиназами.

Ячейка

841

–850,5.

Pourquier, P. и Pommier, Y. (

2001

) Опосредованное топоизомеразой I повреждение ДНК.

Adv. Cancer Res.

189

–216,6.

Шуман, С. (

1992

) Два класса реакций присоединения концов ДНК, катализируемых топоизомеразой осповакцины I.

J. Biol. Chem.

267

16755

–16758.7.

Швейструп, Дж. К., Кристиансен, К., Громова, И. И., Андерсен, А. Х. и Вестергаард, О. (

1991

) Новый метод разобщения реакций расщепления и лигирования эукариотической топоизомеразы I. Способ действия камптотецина в конкретном сайте узнавания.

J. Mol. Биол.

222

669

–678,8.

Pourquier, P., Pilon, A., Kohlhagen, G., Mazumder, A., Sharma, A. и Pommier, Y. (

1997

) Захват топоизомеразы I млекопитающих и рекомбинации, индуцированные поврежденной ДНК, содержащей зазоры или разрывы: важность конечного фосфорилирования ДНК и эффекты камптотецина.

J. Biol. Chem.

272

26441

–26447.9.

Pommier, Y., Kohlhagen, G., Pourquier, P., Sayer, J.M., Kroth, H.и Джерина Д. (

2000

) Аддукты бензо [ a ] пирена и эпоксида в ДНК являются мощными ингибиторами нормального сайта расщепления топоизомеразы I и мощными индукторами расщеплений других топоизомеразы I.

Proc. Natl Acad. Sci. США

2040

–2045. 10.

Pommier, Y., Kohlhagen, G., Laco, G.S., Sayer, J.M., Kroth, H. и Джерина Д. (

2000

) Позиционно-специфический захват комплексов расщепления топоизомераза I-ДНК интеркалированными аддуктами эпоксида бензо [a] пирендиола по 6-аминогруппе аденина.

Proc. Natl Acad. Sci. США

10739

–10744.11.

Pourquier, P., Ueng, L.-M., Kohlhagen, G., Mazumder, A., Gupta, M., Kohn, K.W. и Pommier, Y. (

1997

) Влияние включения урацила, несовпадений ДНК и абазических сайтов на активность расщепления и лигирования топоизомеразы I млекопитающих.

J. Biol. Chem.

272

7792

–7796.12.

Chen, A.Y. и Лю Л.Ф. (

1994

) Топоизомеразы ДНК: важные ферменты и летальные мишени.

Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol.

194

–218,13.

Гупта, М., Фухимори, А. и Pommier, Y. (

1995

) Топоизомеразы ДНК эукариот I.

Biochim. Биофиз. Acta

1262

–14.14.

Pommier, Y., Pourquier, P., Urasaki, Y., Wu, J. и Лако, Г. (

1999

) Ингибиторы топоизомеразы I: селективность и клеточная устойчивость.

Обновление лекарственной устойчивости

307

–318.15.

Струмберг, Д., Пилон, А.А., Смит, М., Хики, Р., Малкас, Л. и Pommier, Y. (

2000

) Превращение комплексов расщепления топоизомеразой I на ведущей цепи рибосомной ДНК в двухцепочечные разрывы 5′-фосфорилированной ДНК за счет стока репликации.

Мол. Клетка. Биол.

3977

–3987,16.

Янг, С.-В., Бургин, А.Б., Хьюзенга, Б.Н., Робертсон, К.А., Яо, К.С. и Нэш, Х.А. (

1996

) Эукариотический фермент, который может разъединять тупиковые ковалентные комплексы между ДНК и топоизомеразами типа I.

Proc. Natl Acad. Sci. США

11534

–11539.17.

Пулио, Дж. Дж., Яо, К. К., Робертсон, К. А. и Нэш, Х.А. (

1999

) Дрожжевой ген фосфодиэстеразы Tyr-ДНК, которая восстанавливает ковалентные комплексы topo I.

Наука

286

552

–555.18.

Interthal, H., Pouliot, J.J. и Шампу, Ж.Дж. (

2001

) Тирозил-ДНК-фосфодиэстераза Tdp1 является членом суперсемейства фосфолипаз D.

Proc.Natl Acad. Sci. США

12009

–12014,19.

Пулио, Дж. Дж., Робертсон, К. А. и Нэш, Х.А. (

2001

) Пути репарации ковалентных комплексов топоизомеразы I в Saccharomyces cerevisiae .

Гены Клетки

677

–687.20.

Роблес, Дж., Бельтран, М., Марчан, В., Перес, Ю., Травессет, И., Педросо, Э. и Грандас, А. (

1999

) К нуклеопептидам, содержащим любую трифункциональную аминокислоту.

Тетраэдр

13251

–13264,21.

Efcavitch, J.W. (

1990

) Электрофорез синтетических олигонуклеотидов. В Диквуде, Д. и Hames, B.D. (eds),

Гель-электрофорез нуклеиновых кислот. Практический подход

, 2-е изд. IRL Press, Oxford, pp.

125

–149.22.

Pourquier, P., Takebayashi, Y., Urasaki, Y., Gioffre, C., Kohlhagen, G. и Pommier, Y. (

2000

) Индукция комплексов расщепления топоизомеразы I 1-β-D-арабинофуранозилцитозином (Ara-C) in vitro и в клетках, обработанных ara-C.

Proc. Natl Acad. Sci. США

1885

–1890,23.

Montserrat, F.X., Grandas, A., Eritja, R. и Педросо, Э. (

1994

) Критерии экономичного крупномасштабного твердофазного синтеза олигонуклеотидов.

Тетраэдр

2617

–2622,24.

Rabanal, F., Giralt, E. и Альберисио, Ф. (

1992

) Новый якорь на основе флуорена для твердофазного синтеза защищенных пептидов.

Tetrahedron Lett.

1775

–1778,25.

Альберисио, Ф., Крус, М., Дебетун, Л., Эритха, Р., Жираль, Э., Грандас, А., Марчан, В., Пастор, Дж. Дж., Педросо, Э., Рабанал, Ф. и др. . (

2001

) Улучшенный синтез N — [(9-гидроксиметил) -2-флуоренил] янтарной кислоты (HMFS), универсального инструмента для твердофазного синтеза биомолекул.

Synth. Commun.

225

–232,26.

Кормиш-Боуден, А. (

1995

) Основы ферментной кинетики .Портленд Пресс, Лондон, Великобритания 27.

Зубай, Г. (

1998

) Кинетика ферментов. В Браун (ред.), Биохимия. Dubuque, IA , pp.

158

–176.28.

Pommier, Y., Jenkins, J., Kohlhagen, G. и Leteurtre, F. (

1995

) ДНК-рекомбиназная активность эукариотической ДНК-топоизомеразы I; эффекты камптотецина и других ингибиторов.

Mutat. Res.

337

135

–145,29.

Boyer, P.D. (

1971

) Ферменты , 3-е изд.Academic Press, Нью-Йорк, 30 Нью-Йорк.

Бейдлер, Д. и Cheng, Y.C. (

1995

) Индукция камптотецином зависимого от времени и концентрации снижения топоизомеразы I и ее влияние на активность камптотецина.

Mol Pharmacol.

907

–914,31.

Десаи, С.Д., Ли, Т.К., Родригес-Бауман, А., Рубин, Э.Х. и Лю Л.Ф. (

2001

) Опосредованная убиквитином / 26S протеасомой деградация топоизомеразы I как механизм устойчивости к камптотецину в опухолевых клетках.

Cancer Res.

5926

–5932.

Специальный выпуск: Новые применения и разработки в химии синтетических пептидов

Уважаемые коллеги,

Терапевтические препараты на основе пептидов имеют большое значение в биомедицине для лечения патологий огромного социального воздействия, включая рак, нейродегенерацию и вирусные заболевания, такие как нынешняя пандемия COVID-19. В этом контексте пептидные ингибиторы ферментов SARS-CoV-2 изучаются для борьбы с новым коронавирусом.Пептиды способны взаимодействовать с биомакромолекулами, участвующими в важнейших биологических путях, таких как белки и нуклеиновые кислоты. Более того, после функционализации нуклеиновыми основаниями ДНК они становятся мощными инструментами нацеливания на ДНК и РНК, что подтверждается научной литературой о пептидных нуклеиновых кислотах (ПНК) и нуклеопептидах с известным диагностическим и терапевтическим потенциалом. Тем не менее, аналоги пептидов другой природы наделены свойствами самосборки, лежащими в основе супрамолекулярных ансамблей и наноматериалов, которые привлекают все большее внимание в наномедицине и биотехнологии.В этом специальном выпуске мы хотим сосредоточиться на новых экспериментальных и теоретических подходах к дизайну и разработке пептидов, уделяя особое внимание твердофазному синтезу природных пептидов, ПНК, нуклеопептидов, пептоидов и более общих аналогов пептидов. Тем не менее, вклад в синтез раствора мономеров аминокислот в качестве строительных блоков для удлинения пептидной цепи, а также взаимодействия пептид-нуклеиновая кислота и пептид-белок, агрегации пептидов, химии нуклеоаминокислот и нуклеопептидов, комплексов пептид-металл и антимикробных полиамино кислоты также приветствуются, поскольку они могут улучшить общие знания в отношении химии на основе аминокислот на стыке между дизайном пептидов и фармацевтическими применениями.Другие темы, представляющие интерес, связаны с применением вычислительной химии в науке о пептидах.

В этот специальный выпуск можно присылать как оригинальные статьи, так и обзоры, описывающие исследования и идеи по темам, рассматриваемым в этом выпуске, для новых приложений и разработок в химии синтетических пептидов.

Доктор Джованни Н. Ровьелло
Доктор Розанна Палумбо
Приглашенные редакторы

Информация для подачи рукописей

Рукописи должны быть представлены онлайн по адресу www.mdpi.com, зарегистрировавшись и войдя на этот сайт. После регистрации щелкните здесь, чтобы перейти к форме отправки. Рукописи можно подавать до установленного срока. Все статьи будут рецензироваться. Принятые статьи будут постоянно публиковаться в журнале (как только они будут приняты) и будут перечислены вместе на веб-сайте специального выпуска. Приглашаются исследовательские статьи, обзорные статьи, а также короткие сообщения. Для запланированных статей название и краткое резюме (около 100 слов) можно отправить в редакцию для объявления на этом сайте.

Представленные рукописи не должны были публиковаться ранее или рассматриваться для публикации в другом месте (за исключением трудов конференции). Все рукописи тщательно рецензируются в рамках процесса одинарного слепого рецензирования. Руководство для авторов и другая важная информация для подачи рукописей доступна на странице Инструкции для авторов. Pharmaceuticals — это международный рецензируемый ежемесячный журнал открытого доступа, публикуемый MDPI.

Пожалуйста, посетите страницу Инструкции для авторов перед отправкой рукописи.Плата за обработку статьи (APC) для публикации в этом журнале с открытым доступом составляет 1800 швейцарских франков. Представленные статьи должны быть хорошо отформатированы и написаны на хорошем английском языке. Авторы могут использовать MDPI Услуги редактирования на английском языке перед публикацией или во время редактирования автора.

инструкций, дозировка, рекомендации. II. фармакологические органы

Препарат представляет собой экстракт селезенки большой роговой тонкости. Найдите нуклеотиды, пептиды, органические кислоты и другие биологически активные речевые регуляторы метаболических и гормональных процессов.

Фармакологическая дия

Нуклеопептид, увеличивающий сопротивляемость организма.

Отмена активации антитоксической функции печени.

показывает

застрял

Нуклеопептид эффективен для подготовки боевых и выставковых близнецов, збилшу м’язу масу и тон, я закрашу яркостью наружу.

Застой нуклеопептидов у шелковисто-любимых животных позволяет снизить норму живого масла на 12-25%, среднегодовую норму на 10-15%, снизить степень доброкачественности мяса на 6-12%, коэффициент потери звука, а в случае хутров

Методы дозирования и пополнения

Методы хранения нуклеопептидов для других домашних животных (кошек, собак, птиц).

Для улучшения мясной массы у животных Виставк и собак мальчишеских пород, а также для улучшения качества на открытом воздухе. Его следует вводить в виде добавки или внутрь в дозе 0,1-0,2 мл на кг за 3-5 дней за 1 месяц до родов или один раз в 15 дней в той же дозе в течение активного периода, но не более 6 месяцев. . Во время курса требуется перерыв в 2-3 месяца.

Методом повышения устойчивости организма к внешним инфекциям, а также для увеличения роста и развития пищи: для новорожденных кохинат и цуценатов — посередине, в дозе 2–3 мл для других. отличные годы, 5-10 мл на 3 дня сна; Вырастают до цуценят и казаков и растут до детей, либо внутренне в дозе 0.1-0,2 мл / кг массы 1 раз в сутки в течение трех дней, в период а в середине сезона и в.)

При стойких хронических заболеваниях этиологии развития у всех видов тваринов (хронические отит, конъюнктивит, экземы, дерматит, фурункулез и др.) со специфической терапией. При необходимости курс повторять каждый месяц.

Птахам — при потере последнего вида не всасывается полностью — от 0,5 до 2 мл, 1 раз в сутки в течение 3-5 дней.

Способ хранения нуклеопептидов для разнообразных шелковистых существ.

Заставим детей расти с идеей полировки развития, увеличения массы и улучшения качества снаружи, Нуклеопептиды будут застревать в небольшом количестве, а внутри — 0,1-0,2 мл на 1 кг.
молодняк — 1 раз в сутки 3 дня подряд, затем 1 раз в 15 дней в течение всего периода роста или внутрь по 2-3 мл на стакан.
Мы будем выращивать тварей — за 1-1,5 месяца до убоя, один раз в день в течение 5 дней.

Для новорожденных телят, поросят, ягнят для развития резистентности и ускорения созревания в дозе 0.1-0,2 мл на кг живого веса 1 раз в сутки в течение 3 дней.

Однолетним животным с увеличением роста Нуклеопептид следует вводить в среднюю треть тела один раз в 15 дней в дозе 0,1-0,2 мл на кг. За 10 дней до убоя препарат следует прищипнуть.

Факт. В эту випадку ходят те, что нуклеопептиды мстят пептидам и нуклеотидам. Реховини давно вивчени. Гормоны (например, окситоцин, вазопрезин), ферменты вводятся раньше пептидов, и они добавляются к аппетиту и т. Д.Пептиды — это еще более короткие копья желчи. Зловоние регулирует большое количество процессов в организме, передает информацию клеточной линии, запускает процессы саморегуляции и регенерации клетки, а также некоторые из самых необходимых стимуляторов для стимуляции роста гормонов, повышая концентрацию 7- 15 Нуклеотиды также играют роль в биологических процессах. Зловоние служит пробуждающими блоками в синтезе нуклеиновых кислот и, таким образом, участвует в молекулярных механизмах, в дополнение к которым генетическая информация сохраняется и передается от клетки к клетке.Кроме того, нуклеотиды принимают участие в реакциях речевого и энергообмена. Запах — основа индукции ДНК и РНК.

По-видимому, широкий спектр заболеваний по выработке нуклеотидов и пептидов, которые оказывают комплексное действие на организмы.

Естественно, речь не идет о том, чтобы забыть об индивидуальных особенностях организма, получить удовольствие от обсуждения препарата заводчиками, а также заглянуть в офис по поводу VIP-тестирования.

Миф.Эффективность препарата не зависит от

г.

Факт. С точки зрения навпаки — эффективность препарата документально подтверждена и действует на основании данных КПЧ и свиней, а также других домашних животных. Нуклеопептид є зарегистрирован в лыкарском засобе.

Миф. Нуклеопептиды допускаются в зависимости от того, что может храниться без изменений.

Факт. Это далеко не так, так как его описывают как вище, в основном лекарственное средство завдання — улучшение мясной мази и развитие резистентности организма.Для самодельных блюд тим коричный, который ускорит развитие, поливая само мясо, а не жир или воду, не смакуя и не окрашивая биохимические показатели мяса для оживления витаминов до 4000-5000 руб. за одну напасть.

Что касается других домашних продуктов, нуклеопептиды можно использовать для выращивания мяса и полировки, так что это дает хороший вид на дисплее, а также позволяет в комплексе с другими лекарствами слабо сохранить потомство.

Также препарат поможет пациенту оправиться от болезней и травм.

Миф. Нуклеопептиды, как и все БАДы, малоэффективны, это просто витамины для еды. Вино не шкидливое, эль и не коричневое

Факт. Нуклеопептид легко назвать витамином. Это отличный стимулятор роста на основе антибиотиков, который не подавляет качество прекрасного продукта при большой роговой худобе и не требует отрицательного воздействия на другие домашние вещи.У детей существ может отсутствовать реакция на препарат при наличии индивидуальных особенностей, однако для того, чтобы эффект был заметен, необходимо вмешиваться в существ. Результаты хранения Нуклеопептида еще лучше представлены в звуках и действиях последнего времени, там проводится эксперимент с двумя группами тваринов, контрольная группа не дает Нуклеопептиды, и группа одобрена использованными схемами.

Миф. Я побоюсь давать существам новый наркотик.

Факт. Нуклеопептид — зарегистрированный лыкарский засиб, ЩО МОЖЕТ ВСЕМ ТРЕБУЕТСЯ СЕРТИФИКАЦИЯ. При этом за препарат не мстить ни на одном химическом и синтетическом складе, он абсолютно не для организма. Передозировка препарата может снизить активность и временно повысить агрессивность.

Нуклеопептид — ветеринарный препарат биологического происхождения. Эта сила позволяет нормализовать гормоны и обменные процессы в организме при приеме пищи. Дать вихованцам Нуклеопептид просто.Доказательства прототипа в Nyogo практически бессмысленны. Надо корявые инструкции лишить и норм переподключения урезать.

Описание и мощность препарата

Нуклеопептид представляет собой биологический иммуностимулятор, например:

дополнительная помощь в формировании в организме существа первозданного механизма антивирусных и прочих жворюван детей;
улучшение здоровья печени и за счет антитоксической функции органа;
Распишу разворот кормов;
увеличился рост и количество существ;
Повышу тонус организма, опущу талию;
терапевтический эффект пидсилю в лечении хронических недугов.

Основа Нуклеопептида — это экстракт плети селезенки. В них есть природные запасы: пептиды, нуклеиновые и органические кислоты и другие биологически активные компоненты. Нуклеопептид используется в виде стандарта для инъекций. Видна еще большая непрозрачность цвета желто-коричневого цвета с колючками: ярко или близко.

Увага! Склад активных слов размером 1 мл — не менее 1 мг.

Когда составы поражены, они должны быть потеряны, а затем из-за небольшого количества хилина они попадают в пушистую осаду.Виробник расфасовывает Нуклеопептид в баночки с крошкой из жевательной резинки и алюминиевыми герметиками. Обсяг — 5, 10, 100 или 200 мл. Флаконы с инструкциями и упаковка в картонные коробки. Также выпускают ликер в ампулах по 1 мл.

Показано и показано на противоположной стороне

Нуклеопептид используется для свиней, пищевых и сельскохозяйственных животных, домашней птицы, кошек и собак. Препарат дополняет девственность к:

Показание прототипа для минимума нуклеопептидов:

аллергическая реакция;
Загострення хронической болезни на первых этапах приема (при более слабой симптоматике).

Инструкция, как избавиться от болезни, давать Нуклеопептид в час государственной фазы заболевания и сразу после вакцинации. Неосторожно лечить препарат физически у женщин. Биостимулятор не конфликтует при одночасовом приеме с другими химиотерапевтическими, противомикробными препаратами, витаминными добавками. Планируется вживлять мясо в пищу, лечить отравление нуклеопептидом за 10 дней до убоя.

Препарат следует принимать строго в диапазоне температур от +2 до +25 ° С, в темной и сухой смеси.Нуклеопептид используют без запекания. Срок применения непрозрачных флаконов или ампул — 24 месяца. Написание сообщения необходимо будет оплатить за одну дополнительную плату, как указано в инструкции по хранению.

Увага! Пушистые осады при ударе — это норма. Если не похоже, что он не сломан, когда его перегружают, значит, он затвердел.

Существа положительно относятся к наркотику. Установлено предварительным разрешением: проверка нуклеопептидов согласно инструкции по хранению в массе на 12-25%.Точно так же изменится возраст худобы, уменьшится срок и качество мяса, а новый возраст и здоровье станут красивее.

А выкористовували какие-то заготовки для своих созданий?

Нуклеопептид: видео

Нуклеопептид — ветеринарный биопрепарат на основе компонентов пищевого продукта. Иммуностимулятор нового поколения призван отомстить биологически активным компонентам, которые не только укрепляют иммунитет, но и стимулируют рост, развитие, вводят словесный обмен.Препарат распространяется российской компанией «Экохимтех».

Основа Нуклеопептида состоит в том, чтобы сформировать экстракт селезенки большой роговой худобы, чтобы отомстить за биологическую активность речи. Селезенка — это орган иммунной системы. Слова, мстя в них, прорастают нуклеотиды, участвуют в утвержденных нуклеиновых кислотах, которые хранятся в ДНК организма. Пептиды действуют как своеобразный «пробуждающий материал», так как стимулируют рост и развитие пищи, принимают участие в процессе общения.

Название препарата непроницаемое, светло- или темно-коричневого цвета. у банального зберигана на дне могут быть осады, которые легко сломать, если сорвать упаковку. Упакуйте ридин во флакон из темного даже четко очерченного, закупоренного пробками из жевательной резинки. Выробник выпускной бутылки риса объем — 5, 10, 100, 200 мл. Собак рекомендуют купать спиртные напитки в бутылочках. Отличная упаковка при большой толщине. Если вы хотите купить 100-миллиметровую бутылку, вы можете оправдаться в случае большого количества собак, например, в розничной коробке.

Жестокое уважение! Когда флакон разбивается, он начинает лопаться, это не соответствует нормальному проявлению.

як діє

Перед поступлением на склад препарат из натуральных компонентов даст организму комплексную диу:

для повышения иммунитета;
стимулируют рост и развитие;
надают антитоксическое действие на плиту;
вывести гормональный фон;
покрасить лагерь снаружи и стены;
взять набор маси;
краска обмен реховинов.

Стимуляция коммуникативных процессов набором маси, правильная разработка и улучшение внешнего покрытия. Нормализация обмена словами, ростками, укусами, жирами и углеводами, чтобы существо потребляло максимальное количество користия из пищи, которую мы едим. Лики также помогают детям узнать больше о пережитых травмах, операциях, стрессах, важных хронических недугах.

Биостимулятор призван отомстить только безопасным натуральным компонентам, которые за ступенькой, введенной в организм, вводятся группой небезопасных слов.У вас есть склад нетоксичных химических компонентов. Победа — это не тревожный сигнал и раздратування, не накопившаяся в организме собаки.

партнерство

Цена на Нуклеопептиды может меняться при наличии флакона. Флакон на 5 мл в средней упаковке стоит 120 рублей, а упаковка из 5 флаконов по 10 мл обойдется в 770-800 рублей. Хорошие флаконы на 100 мл стоят дешевле — около 300 рублей, эля купувати не хватит на один-два напитка, какой-то привкус в бутылке может занять больше.

Поразитесь текущей цене препарата и купите его прямо здесь:

Показано для засосування

Особенность Нуклеопептида в том, что его можно использовать как профилактическое средство (при заболевании) или как лекарственное средство (часто в комплексе с другими лекарствами). Рекомендуется использовать биостимулятор:

для предупреждения об иммунитете;
для набора мясовой маси;
при установке в стадии роста или развития;
с тривиальной линькой;
с токсикозом под час вагины;
при отравлении.

Багато власников Собаки практикуют хранение нуклеопептидов перед выставками и соревнованиями. Биопрепараты для дополнительной помощи собирают мязову масу, окрашивая шерстяную шубу, у стеснительных более густые и тусклые.

як застосовувати

Легко следовать инструкциям по процедуре, дозировке Нуклеопептида для собак, а также схеме и тривиальности обнаружения патологии:

Нуклеопептиды могут храниться спирально вместе с витаминно-минеральными комплексами, химическими и долгосрочными лекарствами в терапевтических целях.

Показания прототипа и второстепенные события

В инструкции указано, что тест Нуклеопептида для собак практически не является доказательством. У некоторых существ может способствовать индивидуальная непереносимость компонентов, которая может проявляться в аллергических реакциях. В этом случае имеется скользящий биостимулятор для засасывания.

Невозможно использовать препарат при заболевании в фазе, контролируемой температурой тела, а также для животных в предкоматозном и коматозном состояниях.Отменяется от удаления Нуклеопептида Варто в период вакцинации и в случае сильной приостановки.

Называйте биостимулятор не злобно.

Likki может перерасти в острые хронические заболевания и патологии, переходящие в примитивные формы. Ситуация не является поводом для введения препарата.

особые запросы

Вы можете воспользоваться температурным диапазоном от 2 до 25˚C, это определенно сухое место от сонных прогулок. Дети и живые существа не виновны в доступе к флаконам.Розташовуваться зловонием виноватых вдали от еды и продуктов питания.

лика из открытой бутылки можно победить, только протянув доп. Писля Ридина в утилизацию. Писля для раскрытия бутылки следует поместить в холодильник для сберигания.

Використовувати леки в таких ситуациях невозможно:

ридина сменила цвет;
сторонних домов;
осаду не сломили;
после покупки был обнаружен, герметичность флакона была нарушена.

Препарат нельзя принимать к сведению и после окончания срока приема. Дата указана на упаковке. При введении в кожу ряда животных вихованец следует использовать стерильный шприц. Особых посещений не требуется, когда роботы не обязаны ухаживать за ними, некоторые из них не очень хороши как для существ, так и для людей.

Технологии, обращающиеся к детализированным живым организмам за вспомогательными синтезируемыми нуклеотидами и пептидами, с 1902 года на волю судьбы застряли на скорую руку людям в других сферах.Вонючий запах в медицине, Сильском правительстве, косметологии и ветеринарии. В результате роботов по оздоровлению и полировке развития домашних жен и шелковистой редкой худобы был синтезирован препарат «Нуклеопептид». Инструкция по хранению вещей говорить о тех, кто не может себе это позволить, но не только о других созданиях, но и о худобах.

сила препарата

Кто обладает силой нуклеопептида? В инструкции к этому стазису сказано, что мы должны мстить на основе узла, сломанного от внутренних органов пчел (зокрем, от селезенки).Препарат при наличии новых синтетических звеньев и пептидов позволяет активировать гормональную и иммунную системы иммунной системы. «Нуклеопептид» — адаптоген и биогенный стимулятор.

склад

Перед тем, как лекарство «Нуклеопептид» проинструктировать по порядку хранения, на его склад должны быть внесены такие слова, как пептиды, нуклеотидные субстанции, нуклеозиды, кислоты и органическая активность.

Датский препарат хорош для управления обменными процессами в организме существа.Не исключено для рахунка, что в новом очень много тиреоидных и андрогенных гормонов до уровня физиологических границ. В результате приема є стимуляции развития организма существ и активации роста, большое вливание гормона щитовидной железы в обменные процессы.

Победные процессы регенерации, роста и дифференциации тканей Пептиды, представляющие собой короткие частицы альфа-аминокислот, чувствительны к регулирующей инфузии в организме, в результате чего наблюдается эффект улучшения здоровья при наличии хронических заболеваний. и аутоиммунные заболевания у этого существа.В результате очистки интерфероном повышается сопротивляемость иммунной системы, повышается устойчивость организма к вливанию отрубей и токсической речи. В результате возникает необходимость улучшить качество изгибов волос и кожи.

оценка

До того, как препарат «Нуклеопептид» проинструктирован по хранению пищи, он застревает в двух областях: в случае алкогольных напитков и домашнего пива. Для худобы все крупнее и умнее, давайте сэкономим, для некоторых домашних животных можно использовать «Нуклеопептид».Крымские собаки и кишок в инструкции по хранению информации тоже про те, что «Нуклеопептид» можно купить для птиц.

Форма к лекарственному средству

Як вигляда зовни лыкарский препарат «Нуклеопептид»? Вин является народным, так как он может быть разного цвета от желтовато-коричневого до немного сочного. Когда бутылка разбита, она будет звенеть. При тривиальном подъеме лески на дно бутылки могут возникнуть осады, так как конструкцию яка легко сломать. Выробник упакован во флакон из магазина, и искажение может быть разносторонним.Ранним днем в продаже есть ампулы, поэтому есть по 5 пшенных и по 10 пшенных, а также танцы объемом по 100 пшен и 20 пшен.

Як використовувати для самоделок «Нуклеопептид»? Инструкция по приготовлению еды рекомендуется для мелких животных (например, для собак и кисок). Можно создать висновок, ибо сутта видимости правил победителя для великих тварей глупа. В одиночку, що змінюється — эту схему принять.

закат

Як використовуют «Нуклеопептид» при аденоме простаты? Инструкция по хранению продуктов питания с целью заливки препарата 0,1-0,2 мл на килограмм кожи пищи при временном хранении по таким схемам.

Близнецам, которые собираются навещать каждый год, препарат следует вводить третьему лицу после дополнительной инъекции.

Разовая доза вводится не чаще одного раза в два раза. Курс приема препарата составляет от двух до трех месяцев. Введение препарата необходимо пару раз прищипнуть до убоя.Единовременное введение ни в чем не повинно 50 мил.

Препарат по показаниям для ягнят, поросят и телят, а также родившихся с помощью увеличения определения их организмов. Как правило, рекомендуется использовать одну дозу в течение трех дней.

Хорошо известными сельскохозяйственными животными являются препараты Використовойт для улучшения состояния влагалища и улучшения изгибов.

Молодняк — один раз в день, растягивая первые три дня, а затем два кожных дня по одной дозе на весь период роста.Подрастающим существам нужно вводить препарат в разовой дозе через кожу пять дней. Курс препарата нужно исправить за месяц до забоя твари.

Для домашних жен и птиц

Як ще використовуют «Нуклеопептид?» Инструкция по хранению собак и котят рекомендует хранить три разные схемы. Використовюти по 0,1-0,2 мл / л препарата на один килограмм ваги вихованется. Если вы застряли на увеличении массы муз, например, перед показом, то вам нужно ввести одну разовую дозу на три-пять дней после сна.Такой короткий курс варто нужно проводить примерно за месяц до даты спектакля. Также «Нуклеопептид» используется для развития и взросления только для взрослеющих людей и щенков ради взросления со всего мира. Для всех препарат следует принимать коротким трехдневным курсом перед годом купания. В эту выпадку використовуся обидные дополнения: два-три миллилитра, как моложе существо, и 5-10 миллилитров, как старше.

Может также использоваться для птиц, если зловоние страдает от недуга или поглощает пиршество.При птахе препарат следует давать в течение трех-пяти дней, один раз в течение нескольких минут от половины до двух тысячелетий.

Показано для сосания

Биопрепарат можно использовать как використан:

Отмечаю увеличение мясной массы.

Для улучшения качества снаружи.

Для лечения токсикоза до часа вагины.

Якшо є в разработке.

С помощью повышенного содержания организма. Для получения инструкций и информации попробуйте начать прием препарата «Нуклеопептид».

Прототип показан до выпуска «Нуклеопептида»

Согласно инструкции по приему препарата, препарат не используется в агрессивных каплях:

Также существо должно предотвратить непереносимость препарата.

Параллельно с проведением иммунизации.

Якщо помогает критически важення организма.

В случае гостеприимства заразного характера.

Однако видно, что в заготовку твари можно передать товар, даже на его складе, только натуральные ингредиенты.Однако побочная реакция при аллергических проявлениях вполне возможна, хотя менять курс лечения не нужно.

Цэ для подтверждения инструкций по хранению «Нуклеопептида».

MTHFR Decoded — Alliance Integrative Medicine

Успех проекта «Геном человека» открыл возможность тестирования на болезни на совершенно новом уровне. В нашем теле более 50 триллионов клеток. Каждая ячейка содержит ДНК, то есть инструкцию по эксплуатации, чтобы расшифровать, что эта ячейка должна делать.Короткие сегменты ДНК называются генами, которые кодируют определенные белки, которые управляют органами и тканями нашего тела. У человека около 20 000 генов.

В наших генах также есть генетические мутации, называемые SNP (произносится как «кусочки»), или однонуклеопептидные полиморфизмы. Это когда определенные аллели в наших генах переключаются и производят измененный белок, который может нанести ущерб организму. Например, SNP может заменить нуклеотид цитозин (C) на нуклеотид тимин (T) в определенном участке ДНК.SNP обычно встречаются в ДНК человека и не оказывают никакого влияния на здоровье или развитие.

Что такое MTHFR?

Ген MTHFR обозначает метилентетрагидрофолатредуктазу и является одним из самых популярных SNP в нашей популяции. Большинство людей имеют две копии — одну из мамы, один из папы.

Двумя наиболее распространенными мутациями являются C 677 T и A 1298 C, которые обозначают размещение мутации в гене. В зависимости от того, являетесь ли вы гомозиготным (двойная мутация) или гетерозиготным (одиночная мутация), зависит, насколько агрессивен протокол противодействия мутации.

Почему это важно?

Вы не одиноки. До 40-70% населения имеют эту генетическую мутацию. Этот ген контролирует, насколько эффективно метилирование в организме фолиевой кислоты и других витаминов группы В. Это важно, потому что метилфолат играет роль почти во всех аспектах тела. У людей с мутацией снижена способность превращать фолиевую кислоту в активированную или метилированную форму. Исследователи связывают это с повышенной восприимчивостью к сердечным заболеваниям, депрессии, раку толстой кишки, болезни Альцгеймера, инсульту, аутоиммунным заболеваниям и повторяющимся выкидышам.

Мутация связана с более высоким уровнем гомоцистеина, который является маркером воспаления и сердечных заболеваний. Повышенный уровень гомоцистеина также способствует дефициту питательных веществ, таких как фолиевая кислота, B6 и B12.

Метилирование 101

Метилирование — это простая детоксикация, которая задействована почти во всех системах организма.

Помогает детоксикации жиров в печени
Контролирует воспаление
Помогает нейротрансмиттерам, влияющим на настроение, поведение и сон
Очищает организм от тяжелых металлов и токсинов
Восстанавливает ваши клетки и ткани

Если мне нужно пройти тестирование ?

Стоимость генетического тестирования резко упала за последние годы.Диапазон цен может составлять от 50 до 300 долларов. Как только вы узнаете свой статус, его больше никогда не будут проверять. Если вы все же прошли тестирование, убедитесь, что ваш врач проверяет обе мутации: C 677 T и A 1298 C.

Мы предлагаем простой тест слюны, который можно быстро сделать в нашем офисе. Если вам интересно, обратитесь к одному из наших врачей.

Что будет, если я положительный?

Если ваш врач определит, что у вас генетическая мутация, посоветуйтесь с ним, чтобы составить индивидуальный план приема добавок.Кроме того, существуют другие гены детоксикации и метилирования, которые вам могут понадобиться для тестирования.

Каждый человек с мутацией может извлечь пользу из этих общих рекомендаций.

Почините кишечник . Если у вас есть какие-либо признаки синдрома дырявого кишечника или чрезмерного роста дрожжей, вы, вероятно, неправильно усваиваете питательные вещества.
Проверьте свои добавки . Вы должны принимать метилированную форму фолиевой кислоты.
Избавьтесь от ртути .Если у вас есть ртутные амальгамы, обратитесь к стоматологу-биологу, чтобы он их удалил.
Ешьте больше зелени . Положите в тарелку листовую зелень, например шпинат и мангольд, чтобы получить естественные источники фолиевой кислоты.
Измерьте уровень гомоцистеина . У вас также может быть дефицит B12.

Хотите узнать больше? Ознакомьтесь с ресурсами по тезисам.

Доктор Бен Линч

MTHFR.net

Доктор Эми Яско

Произошла ошибка при настройке вашего пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

инструкция по применению, противопоказания, отзывы

Технологии улучшения живых организмов с помощью синтезированных пептидов и нуклеотидов работают на благо человечества в различных областях с 1902 года.Их используют в медицине, косметологии, сельском хозяйстве, в том числе в ветеринарии. Результатом работы над задачей улучшения и улучшения развития домашних животных, животноводства стал «Нуклеопептид». Инструкция по применению рекомендует применять его как для мелких животных, так и для сельскохозяйственных культур.

Состав и свойства препарата

Что такое нуклеопептид? В инструкции по применению указано, что он был создан на основе рисунка из внутренних органов (селезенки) быков.Благодаря синтетическим пептидным связям он активирует иммунную и гормональную системы животного. Препарат действует как адаптоген и биогенный стимулятор.

В составе лекарственного средства содержится:

пептидов;
нуклеозидов;
оснований нуклеотидов;
органических кислот.

«Нуклеопептид» контролирует процессы метаболизма в организме животного за счет того, что на уровне физиологических пределов увеличивается концентрация андрогенных и тиреоидных гормонов.В результате приема препарата стимулируется рост и развитие организма животного, тироидный гормон оказывает мощное влияние на обмен веществ, усиливая регенеративные процессы, рост и дифференциацию тканей. Пептиды (короткие цепи альфа-аминокислот) обладают регулирующим действием на организм, тем самым проявляя лечебный эффект при аутоиммунных и хронических заболеваниях животных. За счет выработки интерферона повышается устойчивость иммунной системы к токсическим и токсическим веществам.Происходит улучшение состояния кожи и волос.

Назначение

Сфера применения препарата двоякая: лечение животных в сельском хозяйстве и использование для домашних животных. Если со скотом все понятно, то для каких животных, живущих в людях, в их домах и сараях, применяется «Нуклеопептид»? Инструкции по применению для собак и кошек содержат рекомендации для других домашних животных, например птиц.

Форма выпуска

Что такое нуклеопептид? Внешний вид? Это жидкость, цвет которой варьируется от светло-желтого до желтовато-коричневого.Если флакон встряхнуть, он пенится. Осадок может оседать на дно при отстаивании, но его структура легко нарушается. Продукт расфасован в стеклянные бутылки различной вместимости. В продаже можно найти раствор в ампулах по 5 или 10 мл и во флаконах по 100, 200 мл.

Как принимать «Нуклеопептид» домашним животным? Инструкция по применению для кошек, собак, то есть мелких домашних животных, не вводит отличий от правил для крупного рогатого скота, в этом случае изменяется только схема применения.

Дозировка

Следующая информация актуальна для сельскохозяйственных животных.

Объем раствора на килограмм веса	Схема
Порционная доза за 1 раз 0,1 — 0,2 миллилитра	Для тех, кто идет на откорме вводится в первую треть шейного отдела.
	Вводят разовую дозу один раз в полмесяца.Курс составляет два-три месяца. За 2 недели до убоя прекратить введение. Больше 50 мл за раз не вводят.
	Новорожденным ягнятам, телятам и поросятам препарат показан для повышения сопротивляемости организма.
	Применяют обычно однократно в течение трех дней.
	Пушные звери для улучшения покрова, прибавки в весе.
	Для молодняка: Один раз в день, первые три дня; затем каждые полмесяца по однократной дозе на период всего роста.
	Для взрослого животного: Вводят каждые 5 дней для однократной дозы. Курс начинается за 30-45 дней до убоя.

Для домашних животных данные другие.

Объем раствора на килограмм веса	Схема
Порционная доза за 1 раз 0,1 — 0,2 миллилитра	Для увеличения мышечной массы перед показом.
	Введите разовую дозу в течение 3-5 дней подряд в месяц до выставки.
	Для роста и развития новорожденных щенков и котят, защиты от вирусных инфекций.
Дозировка в день для молодых 2 — 3 мл, для лиц старше 5 — 10 мл.	Ввести короткий курс за три дня до кормления.
Порционная доза за 1 раз 0.1 — 0,2 миллилитра	В терапии хронических и вялотекущих заболеваний, при токсикозах беременности, лечении паразитарных заболеваний.
Порционная доза за 1 раз 0.1 — 0,2 миллилитра	1 раз в сутки в течение недели в сочетании с курсом лечения.
от 0,5 до 2 миллилитров	Птицы с недугами, перья.
от 0,5 до 2 миллилитров	Один раз в день внутрь в течение 3-5 дней.

Показания

Используется биопрепарат:

для увеличения массы тела;
для улучшения состояния шерсти;
при токсикозе при беременности;
Если есть отставание в развитии и росте;
для повышения сопротивляемости организма;
в борьбе с паразитарными инфекциями.

Каких результатов ожидать от препарата «Нуклеопептид»? Инструкция по применению, отзывы подтверждают, что при его применении сокращаются сроки откорма, достигается до 25% суточного привеса, улучшается качество шкурок пушных зверей, снижается падеж поголовья.

Противопоказания и побочные эффекты

Когда и почему нельзя назначать нуклеопептиды? В инструкции по применению указаны следующие случаи:

при индивидуальной непереносимости препарата;
во время иммунизации;
острые инфекционные заболевания являются основанием для отсрочки;
периодов критического истощения организма.

Учитывая, что в «Нуклеопептид» введены только натуральные компоненты, следует отметить, что он легко передается животными, относится к веществам с низким уровнем риска. Однако может вызвать нежелательную реакцию в виде аллергии и обострения имеющихся хронических заболеваний. Такие побочные эффекты не являются основанием для отмены медикаментозного лечения.

Комбинация в терапии, отзывы

Допустимо ли комбинировать с другими препаратами «Нуклеопептид»? Инструкция по применению для птиц, домашних животных и домашнего скота допускает его сочетание с химиотерапевтическими препаратами, витаминно-минеральными комплексами, а также с лекарственными средствами антибактериального спектра действия.По отзывам заводчиков, Нуклеопептид эффективно лечит хронические свищи, раны, визуально улучшает качество шерсти.

Какие конкретные инструкции существуют относительно введения нуклеопептида? Инструкция по применению напоминает, что его нельзя давать животным при наличии механических примесей или повреждений упаковки.

возможных терапевтических применений для глиобластомы

1. Sontheimer EJ, Carthew RW. Молчание изнутри: эндогенные миРНК и миРНК. Cell 2005; 122: 9-12.

DOIPubMed

2. Филипович В., Яскевич Л., Кольб Ф.А., Пиллаи Р.С. Посттранскрипционное молчание генов с помощью миРНК и миРНК. Curr Opin Struct Biol 2005; 15: 331-41.

DOIPubMed

3. Альварес-Гарсия И., Миска Э.А. Функции микроРНК в развитии животных и болезнях человека. Развитие 2005; 132: 4653-62.

DOIPubMed

4. He L, Hannon GJ. МикроРНК: небольшие РНК, играющие большую роль в регуляции генов. Нат Рев Генет 2004; 5: 522-31.

DOIPubMed

5. Lim LP, Lau NC, Garrett-Engele P, Grimson A, Schelter JM, et al. Анализ микроматрицы показывает, что некоторые микроРНК подавляют большое количество целевых мРНК. Nature 2005; 433: 769-73.

DOIPubMed

6. Chou CH, Shrestha S, Yang CD, Chang NW, Lin YL, et al. Обновление miRTarBase 2018: ресурс для экспериментально подтвержденных взаимодействий микроРНК-мишень. Nucleic Acids Res 2017; 46: D296-D302.

DOIPubMedPMC

7. Гриффитс-Джонс С. Реестр микроРНК. Nucleic Acids Res 2004; 32: D109-11.

DOIPubMedPMC

8. Maracaja-Coutinho V, Paschoal AR, Caris-Maldonado JC, Borges PV, Ferreira AJ, et al. Базы данных некодирующих РНК: текущее состояние и тенденции. Методы Мол Биол 2019; 1912: 251-85.

DOIPubMed

9. Монга И., Кумар М. Вычислительные ресурсы для прогнозирования и анализа функциональных миРНК и их таргетома. Методы Mol Biol 2019; 1912: 215-50.

DOIPubMed

10. Гамбари Р., Фаббри Э, Боргатти М., Лампронти И., Финотти А. и др. Нацеливание на микроРНК, участвующие в заболеваниях человека: новый подход к модификации экспрессии генов и разработке лекарств. Biochem Pharmacol 2011; 82: 1416-29.

DOIPubMed

11. Cheng CJ, Bahal R, Babar IA, Pincus Z, Barrera F, et al. Подавление микроРНК для терапии рака, направленной на микросреду опухоли. Природа 2015; 518: 107-10.

DOIPubMedPMC

12. Тейлор М.А., Шиманн В.П. Терапевтические возможности для воздействия на микроРНК при раке. Mol Cell Ther 2014; 2: 1-13.

DOIPubMedPMC

13. Nana-Sinkam SP, Croce CM. Клиническое применение микроРНК при раке. Clin Pharmacol Ther 2013; 93: 98-104.

DOIPubMed

14. Пива Р., Спандидос Д.А., Гамбари Р. От функций микроРНК к терапии микроРНК: новые мишени и новые лекарства в исследованиях и лечении рака груди. Int J Oncol 2013; 43: 985-94.

DOIPubMedPMC

15. Гамбари Р., Брогнара Э., Спандидос Д.А., Фаббри Э. Нацеливание на онкомиРНК и имитация миРНК-супрессоров опухоли: новые тенденции в развитии терапевтических стратегий миРНК в онкологии (Обзор). Int J Oncol 2016; 49: 5-32.

DOIPubMedPMC

16. Финотти А., Аллегретти М., Гаспарелло Дж., Джакомини П., Спандидос Д.А. и др. Жидкая биопсия и сверхчувствительные системы обнаружения без ПЦР в онкологии. Int J Oncol 2018; 53: 1395-434.

DOIPubMedPMC

17. Mollaei H, Safaralizadeh R, Rostami Z. Заместительная терапия микроРНК при раке. J Cell Physiol 2019. в печати

PubMed

18. Pekarsky Y, Croce CM. Гены некодирующей РНК в патогенезе рака. Adv Biol Regul 2018; 71: 219-23.

DOIPubMed

19. Когуре А., Косака Н., Очия Т. Перекрестный разговор между раковыми клетками и их соседями через миРНК во внеклеточных везикулах: новый игрок в метастазировании рака. J Biomed Sci 2019; 26: 7.

DOIPubMedPMC

20. Монтгомери Р.Л., Ю.Г., Латимер П.А., Стэк С., Робинсон К. и др. Мимикрия микроРНК блокирует фиброз легких. EMBO Mol Med 2014; 6: 1347-56.

DOIPubMedPMC

21. Bader AG. В клинику направляется заместительная терапия микроРНК miR-34-a. Передняя Genet 2012; 3: 120.

DOIPubMedPMC

22. Kwekkeboom RF, Lei Z, Doevendans PA, Musters RJ, Sluijter JP. Адресная доставка терапевтических средств на основе миРНК для сердечно-сосудистых заболеваний: возможности и проблемы. Clin Sci (Лондон) 2014; 127: 351-65.

DOIPubMed

23. Lee YS, Dutta A. Подавляющая опухоль микроРНК let-7 репрессирует онкоген HMGA2. Genes Dev 2007; 21: 1025-30.

DOIPubMedPMC

24. Сэмпсон В.Б., Ронг Н.Х., Хан Дж., Ян К., Арис В. и др. МикроРНК let-7a подавляет MYC и останавливает рост, индуцированный MYC, в клетках лимфомы Беркитта. Cancer Res 2007; 67: 9762-70.

DOIPubMed

25. Вейлер Дж., Хунцикер Дж., Холл Дж.Олигонуклеотиды анти-miRNA (AMO): боеприпасы для нацеливания miRNAs, участвующих в заболевании человека? Gene Ther 2006; 13: 496-502.

DOIPubMed

26. Лу Й, Сяо Дж, Линь Х, Бай Й, Луо Х и др. Один антисмысловой олигодезоксирибонуклеотид против микроРНК (AMO), нацеленный на несколько микроРНК, предлагает улучшенный подход к интерференции микроРНК. Nucleic Acids Res 2009; 37: e24.

DOIPubMedPMC

27. Леннокс К.А., Бельке М.А. Химическая модификация и дизайн олигонуклеотидов антимиРНК. Джин Тер 2011; 18: 1111-20.

DOIPubMed

28. Обад С., дос Сантос СО, Петри А., Хайденблад М., Брум О. и др. Молчание семейств микроРНК за счет нацеливания семян на крошечные LNA. Нат Генет 2011; 43: 371-8.

DOIPubMedPMC

29. Элмен Дж., Линдоу М., Шютц С., Лоуренс М., Петри А. и др. LNA-опосредованное молчание микроРНК у приматов, кроме человека. Nature 2008; 452: 896-9.

DOIPubMed

30. Стенванг Дж., Силахтароглу А.Н., Линдоу М., Эльмен Дж., Кауппинен С.Применение LNA в диагностике и лечении рака на основе микроРНК. Semin Cancer Biol 2008; 18: 89-102.

DOIPubMed

31. Стедель С., Варон С., Нгуен П.Х., Виале В, Шамбонье Л. и др. Ингибирование роста опухолевых клеток желудка с использованием LNA, нацеленной на семена, в качестве специфических долговременных ингибиторов MicroRNA. моль тер нуклеиновых кислот 2015; 4: e246.

DOIPubMedPMC

32. Эберт М.С., Нилсон Дж. Р., Шарп, Пенсильвания. Губки микроРНК: конкурентные ингибиторы малых РНК в клетках млекопитающих. Nat Methods 2007; 4: 721-6.

DOIPubMedPMC

33. Эберт М.С., Шарп, Пенсильвания. Губки с микроРНК: успехи и возможности. РНК 2010; 16: 2043-50.

DOIPubMedPMC

34. Kluiver J, Gibcus JH, Hettinga C, Adema A, Richter MK, et al. Быстрая генерация губок микроРНК для ингибирования микроРНК. PLoS One 2012; 7: e29275.

DOIPubMedPMC

35. Kluiver J, Slezak-Prochazka I, Smigielska-Czepiel K, Halsema N, Kroesen BJ, et al.Создание губчатых конструкций miRNA. Методы 2012; 58: 113-7.

DOIPubMed

36. Ли К.К., Чанг Й.Х., Йе К.Л., Ху Ю.К. Исцеление остеопоротических костных дефектов с помощью бакуловирусных МСК костного мозга, экспрессирующих губки MicroRNA. Биоматериалы 2015; 74: 155-66.

DOIPubMed

37. de Melo Maia B, Ling H, Monroig P, Ciccone M, Soares FA, et al. Дизайн губки miRNA для семейства miRNA miR-17 как терапевтическая стратегия против карциномы вульвы. Mol Cell Probes 2015; 29: 420-6.

DOIPubMed

38. Tay FC, Lim JK, Zhu H, Lin LC, Wang S. Использование искусственных губок с микроРНК для достижения потери функции микроРНК в раковых клетках. Adv Доставка лекарств Ред. 2015; 81: 117-27.

DOIPubMed

39. Лю И, Хан И, Чжан Х, Ни Л, Цзян З и др. Синтетические miRNA-косилки, нацеленные на кластер miR-183-96-182 или miR-210, ингибируют рост и миграцию и вызывают апоптоз в клетках рака мочевого пузыря. PLoS One 2012; 7: e52280.

DOIPubMedPMC

40. Ван З. Принципы технологии антисмысловых олигонуклеотидов, маскирующих MiRNA. Методы Mol Biol 2011; 676: 43-9.

DOIPubMed

41. Бак Р.О., Холленсен А.К., Миккельсен Дж. Управление микроРНК с помощью векторно-кодируемых ингибиторов ложного типа. Мол Тер 2013; 21: 1478-85.

DOIPubMedPMC

42. Мураками К., Миягиши М. Крошечные маскирующие заблокированные нуклеиновые кислоты эффективно связываются с мРНК и ингибируют связывание микроРНК в отношении термодинамической стабильности. Biomed Rep 2014; 2: 509-12.

DOIPubMedPMC

43. Das S. Идентификация и нацеливание микроРНК, модулирующих приобретенную устойчивость к химиотерапии при тройном отрицательном раке молочной железы (TNBC): лучшая стратегия борьбы с химиорезистентностью. Med Hypotheses 2016; 96: 5-8.

DOIPubMed

44. Chan JK, Blansit K, Kiet T, Sherman A, Wong G, et al. Ингибирование miR-21 способствует апоптозу и химиочувствительности при раке яичников. Gynecol Oncol 2014; 132: 739-44.

DOIPubMed

45. Фэн Р., Донг Л. Нокдаун микроРНК-127 обращает устойчивость к адриамицину за счет остановки клеточного цикла и сенсибилизации апоптоза в устойчивых к адриамицину клетках глиомы человека. Int J Clin Exp Pathol 2015; 8: 6107-16.

PubMedPMC

46. Li W, Guo F, Wang P, Hong S, Zhang C. miR-221/222 придает радиорезистентность в клетках глиобластомы посредством активации Akt независимо от статуса PTEN. Curr Mol Med 204; 14: 185-95.

PubMed

47.Чен Л., Чжан Дж., Хан Л., Чжан А., Чжан С. и др. Подавление miR-221/222 сенсибилизирует клетки глиомы к темозоломиду, регулируя апоптоз независимо от статуса p53. Oncol Rep 2012; 27: 854-60.

DOIPubMed

48. Xie Q, Yan Y, Huang Z, Zhong X, Huang L. Нацеливаясь на ось передачи сигналов PI3-K / Akt, микроРНК-221 индуцирует пролиферацию клеток и устойчивость в глиобластоме человека. Невропатология 2014; 34: 455-64.

DOIPubMed

49. Nielsen PE, Egholm M, Berg RH, Buchardt O.Последовательно-селективное распознавание ДНК путем замещения цепи тимин-замещенным полиамидом. Наука 1991; 254: 1497-500.

DOIPubMed

50. Nielsen PE. Нацеливание на двухцепочечную ДНК с помощью пептидной нуклеиновой кислоты (ПНК). Curr Med Chem 2001; 8: 545-50.

DOIPubMed

51. Боргатти М., Лампронти И., Романелли А., Педоне С., Савиано М. и др. Молекулы-ловушки фактора транскрипции на основе химеры пептидной нуклеиновой кислоты (PNA) -ДНК, имитирующей сайты связывания Sp1. J Biol Chem 2003; 278: 7500-9.

DOIPubMed

52. Гамбари Р. Пептидные нуклеиновые кислоты (ПНК): инструмент для разработки модификаторов экспрессии генов. Curr Pharm Des 2001; 7: 1839-62.

DOIPubMed

53. Гамбари Р. Биологическая активность и доставка химер пептидных нуклеиновых кислот (ПНК) -ДНК для фармакотерапии с помощью приманки транскрипционного фактора (TFD). Curr Med Chem 2004; 11: 1253-63.

DOIPubMed

54. Nielsen PE.Пептидные нуклеиновые кислоты (PNA) в химической биологии и открытии лекарств. Chem Biodivers 2010; 7: 786-804.

DOIPubMed

55. Nielsen PE. Нацеливание на гены и модуляция экспрессии пептидными нуклеиновыми кислотами (ПНК). Curr Pharm Des 2010; 16: 3118-23.

DOIPubMed

56. Гамбари Р., Боргатти М., Беззерри В., Николис Е., Лампронти И. и др. Олигодезоксирибонуклеотиды-ловушки и пептидные нуклеиновые кислоты-химеры ДНК, нацеленные на ядерный фактор каппа-B: ингибирование экспрессии гена IL-8 в клетках кистозного фиброза, инфицированных Pseudomonas aeruginosa. Biochem Pharmacol 2010; 80: 1887-94.

DOIPubMed

57. Пандей В.Н., Упадхай А., Чауби Б. Перспективы терапии антисмысловой пептидной нуклеиновой кислотой (ПНК) для лечения ВИЧ. Экспертное мнение Biol Ther 2009; 9: 975-89.

DOIPubMedPMC

58. Manicardi A, Fabbri E, Tedeschi T., Sforza S, Bianchi N, et al. Клеточные поглощения, биостабильность и активность против miR-210 хиральных аргинин-ПНК в лейкемических клетках K562. Chembiochem 2012; 13: 1327-37.

DOIPubMedPMC

59. Fabbri E, Manicardi A, Tedeschi T., Sforza S, Bianchi N, et al. Модуляция биологической активности микроРНК-210 пептидными нуклеиновыми кислотами (ПНК). ChemMedChem 2011; 6: 2192-202.

DOIPubMed

60. Fabani MM, Gait MJ. Нацеливание на MiR-122 с помощью миксеров LNA / 2′-O-метилолигонуклеотидов, пептидных нуклеиновых кислот (PNA) и конъюгатов PNA-пептид. РНК 2008; 14: 336-46.

DOIPubMedPMC

61. Fabani MM, Abreu-Goodger C., Williams D, Lyons PA, Torres AG, et al.Эффективное ингибирование функции miR-155 in vivo пептидными нуклеиновыми кислотами. Nucleic Acids Research 2010; 38: 4466-75.

DOIPubMedPMC

62. Brognara E, Fabbri E, Aimi F, Manicardi A, Bianchi N, et al. Пептидные нуклеиновые кислоты, нацеленные на miR-221, модулируют экспрессию p27Kip1 в клетках рака молочной железы MDA-MB-231. Int J Oncol 2012; 41: 2119-27.

DOIPubMed

63. Маникарди А., Гамбари Р., де Кола Л., Коррадини Р. Получение анти-miR ПНК для разработки лекарств и наномедицины. Методы Mol Biol 2018; 1811: 49-63.

DOIPubMed

64. Gupta A, Quijano E, Liu Y, Bahal R, Scanlon SE, et al. Противоопухолевая активность miniPEG-γ-Modified PNAs для ингибирования MicroRNA-210 для терапии рака. Мол тер нуклеиновых кислот 2017; 9: 111-9.

DOIPubMedPMC

65. Yan LX, Wu QN, Zhang Y, Li YY, Liao DZ, et al. Нокдаун miR-21 в клеточных линиях рака груди человека подавляет пролиферацию, миграцию in vitro и рост опухоли in vivo. Резолюция о раке молочной железы 2011; 13: R2.

DOIPubMedPMC

66. Brognara E, Fabbri E, Bazzoli E, Montagner G, Ghimenton C, et al. Поглощение клеточными линиями глиомы человека и биологические эффекты пептидных нуклеиновых кислот, нацеленных на miR-221. Дж. Neurooncol 2014; 118: 19-28.

DOIPubMed

67. von Neubeck C, Seidlitz A, Kitzler HH, Beuthien-Baumann B, Krause M. Мультиформная глиобластома: новые методы лечения и маркеры стратификации, выходящие за рамки новых лекарств. Br J Radiol 2015; 88: 20150354.

ДОИПубМедПМС

68.Buczkowicz P, Hawkins C. Патология, молекулярная генетика и эпигенетика диффузной внутренней глиомы моста. Передний Oncol 2015; 5: 147.

DOIPubMedPMC

69. Пейс А., Дирвен Л., Куккук Дж.Ф., Голла Н., Флеминг Дж. И др. Рекомендации Европейской ассоциации нейроонкологов (EANO) по паллиативной помощи взрослым с глиомой. Lancet Oncol 2017; 18: e330-40.

DOIPubMed

70. Поливка Ю., Поливка Ю., Голубец Л., Кубикова Т., Прибан В. и др. Успехи экспериментальной таргетной терапии и иммунотерапии пациентов с мультиформной глиобластомой. Anticancer Res 2017; 7: 21-33.

DOIPubMed

71. Аббруззезе С., Маттеони С., Синьор М., Кардоне Л., Нат К. и др. Переназначение препарата для лечения мультиформной глиобластомы. J Exp Clin Cancer Res 2017; 36: 169.

DOIPubMedPMC

72. Artene SA, Tuţă C, Dragoi A, Alexandru O, Stefana Oana P, et al. Современные и новые методы лечения глиобластомы с помощью EGFR. J Иммуноанализ Immunochem 2018; 39: 1-11.

ДОИПубМед

73.Попеску А.М., Александру О., Бриндуса С., Пуркару С.О., Таше Д.Е. и др. Нацеленность на сигнальный путь VEGF и PDGF при лечении глиобластомы. Int J Clin Exp Pathol 2015; 8: 7825-37.

PubMedPMC

74. Троян J, Cloix JF, Ardourel MY, Chatel M, Anthony DD. Биология инсулиноподобного фактора роста I типа и нацеливание на злокачественные глиомы. Neuroscience 2007; 145: 795-811.

DOIPubMed

75. Куэвас П., Карселлер Ф., Ангуло Дж., Гонсалес-Коррочано Р., Куэвас-Бурдье А. и др.Антиглиомный эффект нового низкомолекулярного ингибитора фактора роста фибробластов. Neurosci Lett 2011; 491: 1-7.

DOIPubMed

76. McGranahan T, Therkelsen KE, Ahmad S, Nagpal S. Текущее состояние иммунотерапии для лечения глиобластомы. Варианты лечения Curr Oncol 2019; 20:24.

DOIPubMedPMC

77. Кастро-Гамеро А.М., Пезук Я.А., Брассеско М.С., Тон LG. Ингибиторы G2 / M как возможности фармакотерапии глиобластомы: старое, новое и будущее. Cancer Biol Med 2018; 15: 354-74.

DOIPubMedPMC

78. Кричевский AM, Uhlmann EJ. Олигонуклеотидная терапия как новый класс лекарств от злокачественных опухолей головного мозга: направленные на мРНК, регуляторные РНК, мутации, комбинации и т. Д. Neurotherapeutics 2019. In Press

PubMedPMC

79. Geraldo LHM, Garcia C, da Fonseca ACC, Dubois LGF, de Sampaio E, et al. Терапия глиобластомы в век молекулярной медицины. Тенденции рака 2019; 5: 46-65.

DOIPubMed

80. Анджум К., Шагуфта Б.И., Аббас С.К., Патель С., Хан И. и др. Текущее состояние и будущие терапевтические перспективы терапии мультиформной глиобластомы (ГБМ): обзор. Biomed Pharmacother 2017; 92: 681-9.

DOIPubMed

81. Lozada-Delgado EL, Grafals-Ruiz N, Vivas-Mejía PE. РНК-интерференция для терапии глиобластомы: инновационная лестница от лаборатории до клинических испытаний. Life Sci 2017; 188: 26-36.

ДОИПубМедПМС

82.Туат М, Идбай А, Сансон М, Лигон КЛ. Таргетная терапия глиобластомы: обновленные подходы на основе последних биологических исследований. Энн Онкол 2017; 28: 1457-72.

DOIPubMedPMC

83. Хермансен С.К., Кристенсен Б.В. Биомаркеры микроРНК в глиобластоме. Дж. Neurooncol 2013; 114: 13-23.

DOIPubMed

84. Khalil S, Fabbri E, Santangelo A, Bezzerri V, Cant C, et al. Скрининг массива miRNA выявляет кооперативную регуляцию MGMT между miR-181d-5p и miR-409-3p в глиобластоме. Oncotarget 2016; 7: 28195-206.

DOIPubMedPMC

85. Чан XH, Нама С., Гопал Ф., Ризк П., Рамасами С. и др. Нацеливание на стволовые клетки глиомы путем функционального ингибирования просуществующей онкомы R-138 в злокачественных глиомах. Cell Rep 2012; 2: 591-602.

DOIPubMed

86. Li C, Sun J, Xiang Q, Liang Y, Zhao N, et al. Прогностическая роль экспрессии микроРНК-21 в глиомах: метаанализ. Дж. Neurooncol 2016; 130: 11-7.

ДОИПубМед

87.Бейер С., Флеминг Дж., Мэн В., Сингх Р., Хак С.Дж. и др. Роль миРНК в ангиогенезе, инвазии и метаболизме и их терапевтическое значение в глиомах. Раки (Базель) 2017; 9: E85.

DOIPubMedPMC

88. Wang Y, Wang X, Zhang J, Sun G, Luo H, et al. МикроРНК, участвующие в пути EGFR / PTEN / AKT в глиомах. Дж. Neurooncol 2012; 106: 217-24.

DOIPubMed

89. Regazzo G, Terrenato I, Spagnuolo M, Carosi M, Cognetti G, et al.Ограниченная сигнатура сывороточных miRNA отличает глиобластому от глиом более низкого уровня. J Exp Clin Cancer Res 2016; 35: 124.

DOIPubMedPMC

90. Areeb Z, Stylli SS, Koldej R, Ritchie DS, Siegal T, et al. МикроРНК как потенциальные биомаркеры глиобластомы. Дж. Neurooncol 2015; 125: 237-48.

DOIPubMed

91. Ouyang Q, Xu L, Cui H, Xu M, Yi L. МикроРНК и клеточный цикл злокачественной глиомы. Int J Neurosci 2016; 126: 1-9.

DOIPubMed

92. Yan Z, Che S, Wang J, Jiao Y, Wang C, et al. miR-155 способствует прогрессированию глиомы за счет усиления пути Wnt / β-катенин. Tumor Biol 2015; 36: 5323-31.

DOIPubMed

93. Yang L, Li C, Liang F, Fan Y, Zhang S. MiRNA-155 способствует пролиферации, воздействуя на гомеобокс 1 каудального типа (CDX1) в клетках глиомы. Biomed Pharmacother 2017; 95: 1759-64.

DOIPubMed

94. Costa PM, Cardoso AL, Mano M, de Lima MC.МикроРНК в глиобластоме: роль в патогенезе и возможности таргетной терапии. Цели лекарственного средства, направленного на неврологическое расстройство ЦНС 2015; 14: 222-38.

PubMed

95. Chen L, Kang C. Вмешательства miRNA служат «волшебной палочкой» в обращении признаков глиобластомы. Oncotarget 2015; 6: 38628-42.

DOIPubMedPMC

96. Wang H, Xu T, Jiang Y, Yan Y, Qin R, et al. МикроРНК в глиобластоме человека: снизу вверх. Front Biosci (Landmark Ed) 2015; 20: 105-18.

DOIPubMed

97. Piwecka M, Rolle K, Belter A, Barciszewska AM, ywicki M, et al. Комплексный анализ профиля экспрессии микроРНК в тканях злокачественной глиомы. Мол Онкол 2015; 9: 1324-40.

DOIPubMedPMC

98. Banelli B, Forlani A, Allemanni G, Morabito A, Pistillo MP, et al. МикроРНК в глиобластоме: обзор. Int J Genomics 2017; 2017: 7639084.

DOIPubMedPMC

99. Ciafrè SA, Galardi S, Mangiola A, Ferracin M, Liu CG, et al.Обширная модуляция набора микроРНК в первичной глиобластоме. Biochem Biophys Res Commun 2005; 334: 1351-8.

DOIPubMed

100. Сантанджело А., Имбрусе П., Гарденги Б., Белли Л., Агуши Р. и др. Сигнатура микроРНК из экзосом сыворотки пациентов с глиомой в качестве дополнительного диагностического биомаркера. Дж. Neurooncol 2018; 136: 51-62.

DOIPubMed

101. Чжао Х., Шен Дж., Ходжес Т.Р., Сонг Р., Фуллер Г.Н. и др. Профиль микроРНК сыворотки у пациентов с глиобластомой: анализ выживаемости. Молочный рак 2017; 16:59.

DOIPubMedPMC

102. Лю С., Инь Ф, Чжан Дж., Вича М.С., Чанг А.Е. и др. Регуляторные роли miRNA в трансформации нервных стволовых клеток человека в стволовые клетки глиомы. J Cell Biochem 2014; 115: 1368-80.

DOIPubMed

103. Д’Урсо П.И., Д’Урсо О.Ф., Сторелли С., Маллардо М., Джанфреда С.Д. и др. miR-155 активируется в первичной и вторичной глиобластоме и способствует росту опухоли путем ингибирования рецепторов ГАМК. Int J Oncol 2012; 41: 228-34.

DOIPubMed

104. Ling N, Gu J, Lei Z, Li M, Zhao J, Zhang HT, Li X. МикроРНК-155 регулирует пролиферацию и инвазию клеток, воздействуя на FOXO3a в глиоме. Oncol Rep 2013; 30: 2111-8.

DOIPubMed

105. Zhou J, Wang W, Gao Z, Peng X, Chen X и др. МикроРНК-155 способствует пролиферации клеток глиомы посредством регуляции MXI1. PLoS One 2013; 8: e83055.

DOIPubMedPMC

106. Meng W., Jiang L, Lu L, Hu H, Yu H, et al.Олигонуклеотид анти-miR-155 усиливает химиочувствительность клетки U251 к таксолу, индуцируя апоптоз. Cell Biol Int 2012; 36: 653-9.

DOIPubMed

107. Sun J, Shi H, Lai N, Liao K, Zhang S и др. Сверхэкспрессия микроРНК-155 предсказывает плохой прогноз у пациентов с глиомой. Med Oncol 2014; 31: 911.

DOIPubMed

108. Чжоу Й, Ван Х, Лю З., Хуанг Х, Ли Х и др. Прогностическая роль экспрессии микроРНК-155 в глиомах: метаанализ. Clin Neurol Neurosurg 2019; 176: 103-9.

DOIPubMed

109. Милани Р., Брогнара Е., Фаббри Е., Маникарди А., Коррадини Р. и др. Нацеливание на miR-155-5p и miR-221-3p пептидными нуклеиновыми кислотами индуцирует активацию каспазы-3 и апоптоз в устойчивых к темозоломиду клетках глиомы T98G. Int J Oncol 2019. в печати

PubMedPMC

110. Finotti A, Allegretti M, Gasparello J, Giacomini P, Spandidos DA, et al. Жидкая биопсия и сверхчувствительные системы обнаружения без ПЦР в онкологии (Обзор). Int J Oncol 2018; 53: 1395-434.

DOIPubMedPMC

111. Бертуччи А., Прасетянто Е.А., Септиади Д., Маникарди А., Брогнара Е. и др. Комбинированная доставка темозоломида и анти-mir221 PNA с использованием мезопористых наночастиц кремнезема вызывает апоптоз в устойчивых клетках глиомы. Малый 2015; 11: 5687-95.

DOIPubMed

112. Брогнара Э., Фаббри Э., Монтагнер Дж., Гаспарелло Дж., Маникарди А. и др. Высокие уровни апоптоза индуцируются в клеточных линиях глиомы человека при совместном введении пептидных нуклеиновых кислот, нацеленных на miR-221 и miR-222. Int J Oncol 2016; 48: 1029-38.

DOIPubMed

113. Seo YE, Suh HW, Bahal R, Josowitz A, Zhang J, et al. Опосредованное наночастицами внутриопухолевое ингибирование miR-21 для улучшения выживаемости при глиобластоме. Биоматериалы 2019; 201: 87-98.

DOIPubMedPMC

114. Tomassi S, Ieranò C, Mercurio ME, Nigro E, Daniele A, et al. Катионные нуклеопептиды как новые нековалентные носители для доставки пептидных нуклеиновых кислот (ПНК) и олигомеров РНК. Bioorg Med Chem 2018; 26: 2539-50.

DOIPubMed

115. Avitabile C, Accardo A, Ringhieri P, Morelli G, Saviano M, et al. Включение голых пептидных нуклеиновых кислот в липосомы приводит к быстрой и эффективной доставке. Биоконъюг. Chem 2015; 26: 1533-41.

DOIPubMed

116. Салех А.Ф., Арзуманов А., Абес Р., Оуэн Д., Лебле Б. и др. Синтез и перенаправляющая активность сплайсинга конъюгатов разветвленных, богатых аргинином пептидных дендримеров и олигонуклеотидов пептидных нуклеиновых кислот. Bioconj Chem 2010; 21: 1902-11.

DOIPubMedPMC

117. Turner Y, Wallukat G, Säälik P, Wiesner B, Pritz S, et al. Поглощение клетками и биологическая активность пептидных нуклеиновых кислот, конъюгированных с пептидами, с проникающей способностью и без нее. J Pept Sci 2010; 16: 71-80.

DOIPubMed

118. Ху Дж., Кори Д.Р. Ингибирование экспрессии гена с помощью конъюгатов пептидная нуклеиновая кислота (PNA) -пептид, нацеленных на хромосомную ДНК. Биохимия 2007; 46: 7581-9.

DOIPubMedPMC

119. Hnedzko D, McGee DW, Karamitas YA, Rozners E. Последовательно-селективное распознавание двухцепочечной РНК и усиленное клеточное поглощение катионных нуклеиновых оснований и модифицированных каркасом пептидных нуклеиновых кислот. РНК 2017; 23: 58-69.

DOIPubMedPMC

120. Шираиши Т., Хамзави Р., Нильсен П. Э. Субнаномолярная антисмысловая активность конъюгатов фосфонат-пептидная нуклеиновая кислота (ПНК), доставленных катионными липидами в клетки HeLa. Nucleic Acids Res 2008; 36: 4424-32.

DOIPubMedPMC

121. McNeer NA, Chin JY, Schleifman EB, Fields RJ, Glazer PM, et al. Наночастицы доставляют триплекс-образующие ПНК для сайт-специфической геномной рекомбинации в гематопоэтических предшественниках CD34 + человека. Мол Тер 2011; 19: 172-180.

DOIPubMedPMC

122. Macadangdang B, Zhang N, Lund PE, Marple AH, Okabe M, et al. Ингибирование множественной лекарственной устойчивости путем доставки псевдовирионом SV40 антигенной пептидной нуклеиновой кислоты (ПНК) в культивируемые клетки. PLoS One 2011; 6: e17981.

DOIPubMedPMC

123. Гамильтон С.Е., Симмонс К.Г., Катирия И.С., Кори Д.Р. Клеточная доставка пептидных нуклеиновых кислот и ингибирование теломеразы человека. Chem Biol 1999; 6: 343-51.

DOIPubMed

124. Бертуччи А., Люльф Х., Септиади Д., Маникарди А., Коррадини Р. и др. Внутриклеточная доставка пептидной нуклеиновой кислоты и органических молекул с использованием нанокристаллов цеолита-L.